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巨噬细胞AMPKα1敲除对非酒精性脂肪肝小鼠模型的影响

2023年03月30日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志2023年第1期 作者:王顺意 陈思烁 于天力 林彩霞 王丽京 郑凌云 责任编辑:lascn
摘要:研究巨噬细胞特异性敲除 AMP 活化蛋白激酶 α1 (AMPKα1)对高脂高糖高胆固醇饮食诱导 的非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)小鼠模型的影响并探讨可能的作用机制。

目的 研究巨噬细胞特异性敲除 AMP 活化蛋白激酶 α1 (AMPKα1)对高脂高糖高胆固醇饮食诱导 的非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)小鼠模型的影响并探讨可能的作用机制。

方法 利用 巨噬细胞特异的 cre 小鼠与 AMPKα1 flox / flox (AMPK fl/ fl )小鼠杂交,通过 DNA 基因型鉴定,获得巨噬细胞 AMPKα1 敲 除(AMPK △Mφ )鼠;给予 AMPKα1 flox / flox和 AMPK △Mφ 两种小鼠高脂高糖高胆固醇饮食(HFFC 饮食)12 周诱导 NAFLD 模型;OGTT 测定两种小鼠葡萄糖耐量,HE 染色观察两种小鼠 NAFLD 肝病理改变差异,结合油红 O 染色观察肝脂 滴堆积程度;利用 GC-MS 研究两种小鼠血清脂质组学改变。

结果 DNA 基因型鉴定的凝胶电泳结果显示, AMPKα1 flox / flox 条带为 450 bp,对应野生型条带为 334 bp,lyz2-cre 条带为 700 bp,对应野生型条带为 350 bp;Western blot 结果证实 AMPK △Mφ 小鼠的巨噬细胞不表达 AMPKα,AMPK fl/ fl 对照鼠巨噬细胞中 AMPK 表达;NAFLD 模型中, 与 AMPK fl/ fl 小鼠相比,AMPK △Mφ 小鼠肝组织中更多的肝细胞出现脂肪变性,且油红 O 染色面积增多;OGTT结果显示,与 AMPK fl/ fl 小鼠相比,AMPK △Mφ 小鼠的血糖在 15 min 时显著升高;非靶向脂质组学结果显示 AMPK △Mφ 小 鼠血清中丙酸及乳酸较 AMPK fl/ fl 小鼠显著减少。

结论 巨噬细胞 AMPKα1 敲除促进 NAFLD 小鼠模型肝脂肪变 性并下调血清丙酸和乳酸浓度。

阅读原文:巨噬细胞AMPKα1敲除对非酒精性脂肪肝小鼠模型的影响.pdf

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