广东省实验动物信息网

简介

越来越多的农场动物(牛、绵羊、山羊和猪)被用于实验研究。不同于其他常用实验动物品种，农场动物通常不是标准化的实验动物，多购自于农场或其他养殖来源。考虑到农场动物来源广泛，生产机构和使用机构之间差异较大，同时，农场动物也会携带人畜共患病原，进而影响使用机构的职业健康问题。因此针对农场动物的健康管理是一项非常复杂和具有挑战性的任务。

本文旨在以批判性的思维，帮助动物使用机构做出专业和明智的决策，而非建立一个详尽所有已知病原体的排除清单。确定健康管理和监测方案应是规划未来研究的先决条件。而一个有效且全面的健康管理和监测方案则依赖于主治兽医的专业判断，主治兽医应该有足够的权力采取适当的行动，并有良好的沟通技巧。

农场动物健康管理一般资料

出于现实和经济原因，当需要一个全面的健康定义时，绝大多数用于研究的动物都不是“无菌的”，而是包含一个详尽的驻留（或检测阳性）微生物群。该微生物群可包括任何传染性、机会性或共生的微生物。因此，通常会根据需要“排除的微生物清单”对动物健康状况进行定义。因此，了解病原体监测清单和排除清单之间的区别是很重要的。监测清单可以纯粹提供信息，并可能包括对常驻微生物群的监测，以表明生物排斥预防措施的有效性。排除清单具有更直接的科学重要性，因为如果发现了阳性病原体检测结果，这可能会使实验结果无效，并可能导致大规模的病原体清除计划出现，甚至出于伦理、操作和经济原因替换种群。

动物健康管理应考虑的主要因素有：

1） 合适的动物“健康标准”或“微生物状况”。这意味着不存在特定的致病微生物，而存在与动物模型所需特征完全一致的相关微生物群。这包括其与研究应用相关的特异性和非特异性免疫能力，以保证没有干扰因素。必须制定生物安全保障措施和健康监测计划，以核实有关动物的特定健康标准

2） 制定检测计划。根据动物使用机构的需求，确定检测范围：整个畜群/代表性样本量/入围供应的动物等。对畜群或动物种群进行健康监测的性质、样本量和频率应定制化，并应考虑到诸如动物的来源、饲养条件、健康管理程序(硬件和软件管理)、种群历史污染和潜在污染风险、动物的预期研究用途、相关的病原体排除清单等因素。

3） 与各种供应商(动物、物料、设备、服务等)或研究伙伴有清晰的沟通和良好的合作。强烈建议确保动物供应商不仅应遵守现行法规，还应遵守相关质量管理要求，提供充足的资源，并在程序实施的各个方面遵守动物福利原则。这可以通过参观/审计设施和/或资质认证(如AAALAC认证)来实现或确认。由于生产机构的饲养条件和饲养管理能力可能会影响动物模型和研究结果，因此生产机构的专业程度对动物使用机构也是非常重要的。与生产机构建立真正的伙伴关系非常重要。

4） 操作人员经过完善的培训，对相关物种有丰富的经验。

质量和技术保障协议：

强烈建议与生产机构签订质量和技术保障协议。质量和技术保障协议是一份合同文件，用于协商规定使用机构和生产机构（供应商）之间关于动物饲养管理、检测和质量保障操作等的“质量”要求和“技术”要求。它是根据使用机构的需求建立的，包括动物福利的要求，以及双方的承诺和义务，还包括如责任、资源、沟通、文件、变更控制、偏差和投诉管理、审计等所有关键事项。

动物采购的健康管理考虑因素

从指定种群采购动物:

1)一般原则

每个专业生产机构或使用机构应建立和验证一个或多或少具有限制性的“高可信度健康等级”（代指使用机构和/或生产机构制定的高级别动物健康等级）的定义，以确保动物健康状况符合其用途，并明确用于控制排除和监测动物微生物状况的方法(Figure 1)。

在排除清单上，应标明根据国标、行标等规定的病原体，因为可以通过其他途径确认动物健康状况。应该关注动物携带病原体的风险，这些动物可能携带（或间歇性排毒）致病类、寄生虫类或人畜共患类病原体，但动物本身没有表现出任何临床症状或损伤。因此，动物健康检测计划应包括血清学和/或直接检测病原体的方法。

专业生产机构应提供:(a)病原体监测清单、检测频率、抽样策略和方法;(b)病原体排除清单，为每个可能被检测到阳性的病原体提供预案。例如，如果阳性病原体具有致病性或可能严重干扰科学使用，预案可包括立即淘汰或净化种群;如果阳性病原体对种群的影响有限，可延迟或有计划的重建种群；如果感染了机会病原体，对实验项目或研究活动的影响很小，可能不需要采取行动。

有些研究可能需要使用不含特定抗体的动物，例如兽医疫苗的研发和传染病的研究。在这种情况下，血清学检查不仅能够监测繁殖种群中病原体是否存在，也是某些类别疫苗有效性和安全性研究的先决条件。

2）健康管理和监控抽样程序

不同种群（包括同一个生产机构的不同种群）的饲养管理条件不同，因此，病原体感染发生率也可能不同。每个机构应根据适用的政府法律、法规和机构政策制定农业动物饲养管理和使用方案，并明确指定权限。生产机构之间，以及生产机构不同设施之间，设施环境和病原体情况差异可能很大，并可能影响研究结果。

3）病原体排除和健康监测

为维持既定的健康标准，需要合理实施全面的“病原体排除”方案，以实现动物种群的“零污染”。它需要良好的设施设计，包括地板、墙壁、天花板、房屋、笼具和搬运设备的表面，以及合理且完善的人员资质和培训体系。应制定健康监测方案，不断评估并合理执行。病原体状况未知或受污染的动物应进行适当检疫或隔离，并采取适当的安全措施，以防止不良或危险的传染源传播给洁净的动物或人类。

4）种群淘汰和净化政策

在某些情况下，有必要淘汰或重新净化种群。例如:

a:当阳性病原体感染，影响动物健康和福利，或影响研究相关的关键指标时，应尽快决定。最合适的操作取决于要消除的病原体的数量和性质，以及动物的预期用途。在病原体从动物传播到动物的情况下，仅淘汰检测呈阳性的动物可能无法有效地从种群中消除病原体(尽管它可能大大降低感染比例和流行率)。如果病原体是通过媒介(如昆虫)传播的，那么淘汰检测呈阳性的动物可能就足够了(只有在媒介也被消除的情况下)。

b:如果有治疗/预防措施可以消除病原体，在阳性病原体的少量感染，不产生明显的病理和不影响关键的研究指标的情况下，则不必急切淘汰或净化种群。应评估治疗的可能结果。

从农场采购动物(农场供应商):

任何疾病进程——无论是营养性、环境性、肿瘤性还是感染性——都需要加以控制。鉴于农场的生产环境相对不受控制，其生产的集约化性质，控制这些因素比啮齿动物要困难得多。

对农场进行全面审查是必要的，审查内容包括农场管理、任何现场相关疾病、动物定期临床检查等，以确保提供健康的动物。此外，农场动物的典型寿命受限于它们的使用目的。如果为了研究目的，动物可能需要被饲养更长的时间，可能会出现不常见的临床观察或病变。

1)农场供应商的选择标准

农场环境可能因其主要活动(遗传选择、育种、生长)、位置、室外或室内饲养等而有很大差异。应进行农场现场审查。第一次现场审查是非常重要的，以便检查动物是如何饲养管理的，生物安全措施到位，并提出可能与动物的具体用途有关的问题。如果使用机构决定与养殖场合作，则应定期进行审查，并应准备并落实合作协议。在相关情况下，合作协议可包括使用机构的技术支持，允许改善动物饲养条件和工作方式。

评估潜在供应商时应考虑的关键指标是:

a:设施类型和动物饲养条件，以及生产机构的生物安全措施(控制野生动物和害虫，动物的流向，清洁和消毒程序等);

b:农场的历史健康状况以及所进行检查的数量和类型(畜群健康监测计划，包括临床检查信息，身体状况评分(BCS));

c:核实饲养者是否引进新动物(来自其他供应商)或生物材料，引进频率，以及相应的健康检查报告;

d:农场与动物使用机构的距离;

e:提供必要时将动物隔离的设施(检疫、治疗等);

f:检查动物的运输方式，和从装载到交付的时间周期;

g:明确和透明的沟通和相互信任是良好合作的必要条件(任何影响动物和种群管理的重大事件都应向使用机构报告);

h:在双方签署的合作协议中正式确定对动物的要求，这有助于确定相互的责任，明确未来的沟通，并有助于进行定期审查(Figure 2);

i:农场的能力-在要求的时间内交付合格动物数量的能力。

使用机构的兽医应对每个潜在生产供应商的健康管理体系进行评审，其目的是评估当前的健康和福利状况，最好是与农场兽医一起进行评审。

应审查的共同文件包括:(a)畜群健康计划，(b)农场生物安全政策，(c)农场可能持有的任何特定/官方健康资质和相关记录，以及(d)与使用兽药有关的记录。

2)动物选择的标准

在确定或实施针对畜群的健康监测方案后，才可以进行对动物的个别评估。最重要的是，被筛选的动物应无任何临床疾病，一般状况良好。在动物筛选的第一阶段，由兽医对动物进行完善的临床检查以及BCS评分，能够提供非常有价值的信息。也可要求提供动物体重数据/采食量数据。可进行各种个体健康筛查监测，以进一步评估动物是否有持续的亚临床健康问题或感染，这些问题或感染可能会影响下游研究。筛查类型可分为两类:(a)一般健康筛查和(b)特定病原体筛查。

(a):一般健康检查

一套完整的临床检查，能够发现临床检查异常症状和易发疾病的危险因素，可以用于安排进一步的检查。完整的临床检查将包括：被检查动物的病史，农场动物的疾病历史，对环境的观察，对动物进行远距离观察，详细观察动物并检查所选的动物群体。动物应从鼻子到尾巴进行检查，使用检查、触诊和听诊。

临床检查应以严格统一的方式进行，并记录在动物个体评估表上，检查项目如下:

• 身体姿势；

• 头部的检查和触诊（包括下颌骨、牙齿和口腔）、颈部、左胸腹、右胸腹、尾端、阴道检查、直肠检查、乳房或雄性动物的外生殖器；

• 粪便的一致性(成形或光滑、颜色、气味、肛门区域和脏尾巴)；

• 肺部听诊心脏和胃/肠；

• 心脏和呼吸频率；

• 呼吸类型(腹部/肋部)；

• 运动对称性；

• BCS评分。BCS是畜群管理的重要工具。猪的BCS是基于对肋骨、臀部和脊柱的触诊，BCS从1(过瘦)到5(过胖)不等。

除了特定病原体检测外，通过检查动物的血液学/生化状态，例如通过分析为特定疾病调查而采集的血液样本，评估动物的生理健康可能是有用的。血液学和生化档案不仅可以发现未检测到的持续感染过程的证据，还可以检测到其他生理紊乱。

参考文献:

Caristo M E ,  Ferrara F ,  Hardy P , et al. Federation of European Laboratory Animal Science Associations recommendations of best practices for the health management of ruminants and pigs used for scientific and educational purposes[J]. Laboratory Animals, 2021(2).