(1)注射糖皮质激素诱导肺部烟曲霉菌感染：①造模方法：烟曲霉菌孢子悬液制备：取烟曲霉菌菌株接种于沙氏琼脂平板培养基上，37℃培养48h，30℃培养3～5d用0.5g/L吐温80的生理盐水10ml冲洗琼脂表面收集分生孢子悬液，通过8层无菌纱布过滤以去除菌丝，血球计数板计数孢子数量，孢子悬液转入15ml离心管中，10000g离心15min，去除上清，孢子重悬在生理盐水中，调整孢子悬液浓度为1×10的11次方/L活菌在平板上10倍系列稀释定量培养以检测孢子活性。小鼠皮下注射甲基泼尼松龙100mg/(kg·d)，共3d。肌内注射速眠新麻醉后保持垂直，用移液枪吸取30μl烟曲霉菌孢子悬液缓慢滴入小鼠双侧鼻孔，维持垂直体位3～5min，连续3d。分别于感染后12h，72h和96h脱颈处死，血液、右肺组织和肝组织匀浆进行真菌培养，左肺组织用40g/L甲醛溶液固定，石蜡包埋切片，常规HE染色，进行组织病理学检查。②结果：小鼠感染后12h，72h及96h时，免疫抑制感染组小鼠血液、肺、肝组织均培养阳性。在沙氏琼脂平板培养基上，烟曲霉菌菌落呈蓝绿色；镜下见分生孢子头顶囊为单层瓶梗，小分生孢子呈球形；革兰染色阳性。肺组织病理改变：烟曲霉菌感染小鼠12h，72h和96h后，免疫抑制感染组小鼠12h时肺组织见多量烟曲霉菌孢子，炎症反应轻微；72h时孢子聚积并生成菌丝，肺组织有肉芽肿形成；96h时孢子大量繁殖，肺泡间隔增宽，肺脓肿形成。正常状态感染组小鼠12h肺组织仅见极少数烟曲霉菌孢子，炎症反应较免疫抑制组重，72h及96h时肺组织仅表现充血及炎症。

(2)注射环磷酰胺诱导肺部烟曲霉菌感染：①造模方法：环磷酰胺150mg/kg于接种前4d及接种前1d腹腔注射，接种当天给予1％戊巴比妥45mg/kg腹腔注射麻醉或5％异氟烷与氧气混合吸入麻醉(吸入麻醉时间180～240s)1×10的8次方个/ml烟曲霉孢子悬液30μl滴鼻。72h开始取肺组织研磨后进行霉菌载量测定，同时进行组织病理检查。模型的病理评价标准包括：a.细支气管受累情况；b.肺组织出血、坏死和淤血的范围；c.PAS染色或Grocott's methamine硝酸银染色见45度角分叉的分隔菌丝或孢子；组织培养烟曲霉阳性。②结果：感染72h后，小鼠肺组织出血弥漫分布的出血坏死灶，多位于气道周围。病灶内可见大量分支状菌丝。

(3)气溶胶吸入法建立小鼠肺侵袭性曲霉菌感染模型：①造模方法：使用烟曲霉菌 AF293，在萨布罗右旋糖琼脂或马铃薯右旋糖琼脂平皿中37％培养1周，以含0.1％(vol/vol)Tween 80的无菌PBS(10ml)冲洗平皿，双层无菌纱布过滤收集霉菌孢子。离心，重悬后以血细胞计数板计数。选用BALB/c小鼠，单次腹腔内注射环孢菌素200mg/kg(以无菌蒸馏水溶解)，皮下注射醋酸可的松250mg/kg(以含0.02％Tween 80的PBS溶解)，五天后重复给药一次，可维持免疫抑制状态。试验在树脂小室中进行，霉菌孢子以100lb/in2压缩空气驱动的小颗粒雾化器雾化，雾化器与管道连接，开口于树脂小室顶部。暴露时间为1h。雾化的孢子悬液为12ml，浓度为10的9次方/ml时可在小鼠肺内产生较稳定的接种数量(平均2.4×1000cfu/小鼠)。整个装置需在负压间的层流柜内进行。小鼠在免疫抑制后第2天感染，每日皮下注射头孢他定5mg，共10d，预防细菌感染。②结果：至第15天时，动物死亡率达60％～75％。肺组织病理切片PAS染色，在感染早期肺组织内曲霉菌菌丝不明显，在7d后有大量菌丝出现，伴有肺组织结构的破坏和血管侵袭。在中性粒细胞数量恢复后，病灶中出现大量中性粒细胞，伴有单核细胞等其他细胞。受侵袭血管内可有血栓形成，并引起肺组织梗死。本模型优势：使用强免疫抑制，小剂量攻毒的方法，每次可同时感染40只小鼠，攻毒剂量稳定。通过吸入感染，感染途径与人自然感染相似；感染剂量较气管内滴入小，动物病情进展较缓和，存活时间长，更适于抗真菌药物的评价。