目的 本研究拟通过在体内和体外诱导训练免疫反应,以探讨诱导训练免疫是否可能逆转免疫耐 受状态。

方法 以 β-glucan 作为训练免疫诱导剂,建立体外小鼠胫骨来源的巨噬细胞( bone marrow derivedmacrophages,BMDM)训练免疫模型:40 μg / mL β-glucan 刺激 BMDM 24 h,随后用 PBS 洗涤后让 BMDM 在完全培养 基中静息 6 d,在第 3 天的时候补充培养基,第 7 天收集细胞 100 ng / mL LPS 再刺激,4 h 后收集细胞抽提 RNA 和 24 h 后收集细胞上清;建立 β-glucan 体内训练免疫模型:野生型 C57BL/ 6J 腹腔注射 1 mg β-glucan,对照组腹腔注射 200 μL 的 PBS,7 d 后感染金黄色葡萄球菌(每只 1 × 10 ⁴ / 200 μL PBS)。 LPS 诱导体外免疫耐受,体外免疫耐受逆 转通过在耐受的 BMDM 中加入 40 μg / mL β-glucan 刺激 24 h,随后让细胞静息 1 d,通过促炎因子的恢复水平来反 映耐受逆转情况。 盲肠结扎穿刺( cecal ligation and puncture,CLP)诱导体内免疫耐受,体内免疫耐受逆转通过向 CLP 组腹腔注射 1 mg β-glucan,通过再次感染非致死剂量的细菌或真菌的生存率反映耐受逆转情况。

结果 (1) 经过 β-glucan 训练的 BMDM,在 LPS 再次刺激时产生更高水平的促炎因子 TNF-α、IL-6 和 NO。 同时,β-glucan 训练 的 BMDM 通过激活 m-TOR 信号通路,导致细胞代谢模式向糖酵解转变,引起细胞内乳酸增多;(2)β-glucan 诱导的 体内训练免疫具有保护作用;(3)β-glucan 在体外能够逆转 LPS 诱导的免疫耐受,恢复 BMDM 促炎细胞因子的产 生;(4)目前我们的结果尚未证实 β-glucan 在体内可以逆转 CLP 诱导的免疫耐受。

结论 本研究成功地建立了 β- glucan 体外和体内训练免疫模型,并证明了在体外 β-glucan 能逆转 LPS 诱导的免疫耐受,但是目前结果尚未证实 β-glucan 在体内能够逆转 CLP 诱导的免疫耐受,提高二次感染生存率。

阅读原文：β-glucan诱导训练免疫及其在逆转免疫耐受中的应用.pdf