目的 探索 ＨＢＶ 感染所致肝纤维化小鼠模型形成条件及表型分析。

方法 以 １８ 只 ＣＢＡ／ ＣａＪ 小鼠 为研究对象，随机分为对照组（ｎ ＝ ４）和实验组（ｎ ＝ １４），实验组按照每只 ２ μｇ 的剂量、通过高压水动力方法进行 尾静脉注射 ｃｃｃＤＮＡ，对照组注射等体积 ＰＢＳ，转染 ６８ 周后采样。 通过 ｑＰＣＲ 方法检测肝中 ＨＢＶ ＤＮＡ 及 ＨＢＶ ｃｃｃＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ 方法检测血清 ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ，免疫组化检测肝组织中 ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ，用一代测序法检测 ＨＢｅＡｇ ^＋ ／ ＨＢｓＡｇ ^－及 ＨＢｅＡｇ ^－ ／ ＨＢｓＡｇ ^＋组织 ＤＮＡ 基因测序，生化分析 ＡＬＴ 和 ＡＳＴ，ＨＥ 染色、天狼星染色及 Ｍａｓｓｏｎ 染色分析肝 组织病理。

结果 实验组中，１００％的小鼠 ＨＢＶ⁃ＤＮＡ 拷贝数高于 １０００ ｃｏｐｉｅｓ／ ｍＬ；小鼠肝组织 ｃｃｃＤＮＡ 拷贝数显著 高于空白组（Ｐ ＜ ０的小鼠血清 ＨＢｓＡｇ 和 ＨＢｅＡｇ 呈阳性；６０％的小鼠肝 ＨＢｓＡｇ 呈阳性和 ２６的小鼠 肝 ＨＢｃＡｇ 呈阳性；ＨＢｅＡｇ ^－ ／ ＨＢｓＡｇ ^＋样本中出现 Ａ１７６２Ｔ／ Ｇ１７６４Ａ 和 Ｇ１８９６Ａ／ Ｇ１８９９Ａ 位点突变，ＨＢｅＡｇ ^＋ ／ ＨＢｓＡｇ ^－样 本出现前 Ｓ２ 区及 Ｓ 区多位点突变；小鼠 ＡＬＴ 值异常率为 ５７值异常率为 ７染色观察到所以实验 组小鼠肝组织损伤及肝炎症浸润，天狼星染色、Ｍａｓｓｏｎ 染色观察到 ９２的肝组织发生纤维化。

结论 通过尾静 脉高压水动力注射 ＣＢＡ／ ＣａＪ 小鼠 ＨＢＶ ｃｃｃＤＮＡ ６８ 周后，ＨＢＶ 主要 ＤＮＡ、ＨＢＶ ｃｃｃＤＮＡ、血清及肝组织 ＨＢｓＡｇ、 ＨＢｅＡｇ 仍然阳性，ＨＢＶ 感染可引起小鼠肝纤维化，甚至可模拟临床 ＨＢＶ ＢＣＰ ／ ＰＣ 基因突变表型。

阅读原文：ＨＢＶ相关肝纤维化小鼠模型的建立及关键表型深度分析研究.pdf