目的 探讨理中丸对脾虚型腹泻大鼠结肠黏膜 ＩＬ⁃２２⁃ＭＵＣ２ ／ ｃｌａｕｄｉｎ⁃２ 信号通路的调控作用。

方法 采用番泻叶水煎液 １联合疲劳游泳建立脾虚型腹泻大鼠模型。 模型大鼠随机分为模型组、蒙脱石散组 （０和理中丸低、高剂量组（０和 ３每组 ８ 只；另选 ８ 只正常大鼠作为空白组。 连续给药 １４ ｄ， 造模结束后可见大鼠体重减轻，精神倦怠、眯眼聚堆、少动，大便质地偏软或者便溏，肛周污秽，提示模型复制成功。 采用比色法检测血清淀粉酶和 Ｄ⁃木糖水平，阿利新蓝和过碘酸雪夫（ＡＢ⁃ＰＡＳ）染色检测结肠黏膜形态结构，蛋白免 疫印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ）检测黏蛋白 ２（ＭＵＣ２）和水通道蛋白 ３ ／ ４（ＡＱＰ３、ＡＱＰ４）的表达，免疫荧光法检测结肠组织 ｃｌａｕｄｉｎ⁃２ 蛋白表达，实时荧光定量⁃ＰＣＲ（ＲＴ⁃ＰＣＲ）法检测白介素⁃２２（ＩＬ⁃２２）和肠黏膜上皮跨膜蛋白 ２（ ｃｌａｕｄｉｎ⁃２）基 因相对表达量（２ －ΔΔＣｔ 值）。

结果 与空白组比较，模型组大鼠稀便率、稀便级和腹泻指数显著增加，结肠组织黏膜 层上皮细胞出现不同程度的萎缩，黏膜表面结构疏松水肿，杯状细胞减少，血清淀粉酶和 Ｄ⁃木糖含量减少，结肠组 织中 ＭＵＣ２、ＡＱＰ３ 和 ＡＱＰ４ 蛋白表达量相对降低，ＩＬ⁃２２ ｍＲＮＡ 表达量相对减少和 ｃｌａｕｄｉｎ⁃２ ｍＲＮＡ 表达量相对增 加，ｃｌａｕｄｉｎ⁃２ 蛋白荧光强度明显增强（Ｐ ＜ ０.０５ 或 Ｐ ＜ ０.０１）；与模型组比较，理中丸高剂量组大鼠稀便率、稀便级 和腹泻指数均明显减少，结肠黏膜病理损伤明显减轻，血清淀粉酶和 Ｄ⁃木糖含量增加，结肠组织中 ＭＵＣ２、ＡＱＰ３ 和 ＡＱＰ４ 蛋白表达量相对升高，ＩＬ⁃２２ ｍＲＮＡ 表达量相对增加，ｃｌａｕｄｉｎ⁃２ ｍＲＮＡ 和 ｃｌａｕｄｉｎ⁃２ 蛋白表达量相对减少，差异 具有统计学意义（Ｐ ＜ ０.０５ 或 Ｐ ＜ ０.０１）。

结论 理中丸明显调节脾虚型腹泻大鼠结肠黏膜屏障结构功能，其机制 可能与增加结肠 ＡＱＰ３ ／ ４ 表达，调控 ＩＬ⁃２２⁃ＭＵＣ２ ／ ｃｌａｕｄｉｎ⁃２ 信号通路有关。

阅读原文：理中丸对脾虚型腹泻大鼠结肠黏膜屏障ＩＬ⁃２２⁃ＭＵＣ２╱ｃｌａｕｄｉｎ⁃２信号通路的影响.pdf