目的 探讨长链非编码 RNA Kinectin 1 反义 RNA 1(lncRNA KTN1-AS1)调控 miR-153-3p / 活化 T 细 胞核因子 5(NFAT5)轴对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。

方法 实时荧光定量 PCR( qRTPCR)、Western blot 分别检测 NSCLC 组织、癌旁组织、人正常肺上皮细胞 BEAS-2B 及 NSCLC 细胞系 A549、HCC827、 H1299 中 KTN1-AS1、miR-153-3p 表达及 NFAT5 蛋白表达;将 A549 细胞分为 Ct 组、si-NC 组、si-KTN1-AS1 组、mimic NC 组、miR-153-3p mimic 组、miR-153-3p mimic+pcDNA 组、miR-153-3p mimic+pcDNA-NFAT5 组,qRT-PCR 检测细胞 中 KTN1-AS1、miR-153-3p 表达;CCK-8 法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;划痕愈合实验检测 细胞迁移;Transwell 检测细胞侵袭;Western blot 检测 NFAT5、细胞周期蛋白 D1 ( CyclinD1)、基质金属蛋白酶 (MMP)-2、MMP-9 蛋白表达;双荧光素酶验证 KTN1-AS1 与 miR-153-3p、miR-153-3p 与 NFAT5 的关系。

结果 在 NSCLC 组织和细胞中,KTN1-AS1、NFAT5 蛋白高表达,miR-153-3p 低表达,且在 A549 细胞中 KTN1-AS1、NFAT5 蛋 白表达最高,miR-153-3p 表达最低(P < 0. 05),因此,选择 A549 细胞为研究对象;与 si-NC 组比较,si-KTN1-AS1 组 KTN1-AS1、NFAT5 蛋白表达降低,miR-153-3p 表达升高( P < 0. 05);与 mimic NC 组比较,miR-153-3p mimic 组 KTN1-AS1 表达量变化差异不显著(P > 0. 05),NFAT5 蛋白表达降低,miR-153-3p 表达升高(P < 0. 05);与 miR- 153-3p mimic 组、miR-153-3p mimic+pcDNA 组比较,miR-153-3p mimic +pcDNA-NFAT5 组 KTN1-AS1、miR-153-3p 表 达量变化差异不显著(P > 0. 05),NFAT5 蛋白表达升高(P < 0. 05);下调 KTN1-AS1 或上调 miR-153-3p 均可抑制 A549 细胞增殖、迁移、侵袭及 CyclinD1、MMP-2、MMP-9 蛋白表达;过表达 NFAT5 减弱了上调 miR-153-3p 对 A549 细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用;KTN1-AS1 靶向调控 miR-153-3p / NFAT5 轴。

结论 沉默 KTN1-AS1 可能通过上 调 miR-153-3p 来抑制 NFAT5 表达,进而抑制 A549 细胞增殖、迁移和侵袭。

阅读原文：lncRNA KTN1-AS1调节miR-153-3p╱NFAT5轴对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.pdf