巨噬细胞条件性Cd226基因敲除小鼠的构建及功能分析
2023年05月17日
来源:中国实验动物学报2023年第4期
作者:秦琪 李娟 杨柳 方亮 陈丽华
责任编辑:lascn
摘要:构建并鉴定巨噬细胞条件性 Cd226 基因敲除小鼠,为研究 CD226 分子调节巨噬细胞表型和 功能影响疾病发生发展提供动物模型。
目的 构建并鉴定巨噬细胞条件性 Cd226 基因敲除小鼠,为研究 CD226 分子调节巨噬细胞表型和 功能影响疾病发生发展提供动物模型。
方法 通过 Cd226 flox / + 雌雄小鼠自交,得到基因型 Cd226 flox / flox 小鼠。 Cd226 flox / flox 与 Lyz2-Cre + 小 鼠 杂 交, 获 得 Cd226 flox / + Lyz2-Cre + 小 鼠, 再 将 其 与 Cd226 flox / flox 小 鼠 杂 交, 最 终 获 得 Cd226 flox / flox Lyz2-Cre +小鼠,即巨噬细胞条件性 Cd226 基因敲除小鼠。 采用 PCR 和琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因 型;采用流式细胞术、qRT-PCR 和 Western Blot 验证小鼠巨噬细胞 CD226 敲除效果;采用 Transwell 实验检测 CD226 对小鼠巨噬细胞迁移能力的影响。
结果 从基因和蛋白水平证实巨噬细胞条件性 Cd226 基因敲除小鼠构建成功。 Transwell 实验结果显示,与对照组相比,巨噬细胞条件性敲除 CD226 分子显著抑制腹腔巨噬细胞的迁移。
结论 成功构建巨噬细胞条件性 Cd226 基因敲除小鼠,为后续深入研究 CD226 调控巨噬细胞功能在免疫性疾病发病中的 作用和机制提供更加精准的实验动物模型。
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