目的 通过增强血管内皮生长因子受体 （vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR） 人源化小 鼠 （hKDR^+/+） 接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力，建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶 点药物的新型荷瘤小鼠模型。

方法 首先建立基于hKDR^+/+人源化小鼠模型评价针对VEGFR靶点抗体体内活性的方 法，同时采用CRISPR/Cas9技术构建重组激活基因1 （recombination activating gene 1，Rag1） 敲除的C57BL/6N 小鼠 （命名为 Rag1 ^-/-小鼠）。然后将 Rag1 ^-/-小鼠与 hKDR^+/+小鼠交配，筛选获得双基因纯合、双靶点基因修饰的 hKDR^+/+/Rag1 ^-/-小鼠。最后在hKDR^+/+、Rag1 ^-/-、hKDR^+/+/Rag1 ^-/-和C57BL/6N小鼠上测试不同小鼠品系来源肿瘤细胞 系的体内肿瘤生长差异。

结果 针对VEGFR靶点设计的抗体在hKDR^+/+小鼠体内表现出明显的抗肿瘤活性，与PBS 组相比，肿瘤体积明显减小 （P<0.01），肿瘤质量明显减轻 （P<0.05）。Rag1 ^-/-小鼠、hKDR^+/+/Rag1 ^-/-小鼠的外周血B 细胞和T细胞数量均明显减少 （P<0.05，P<0.001）。C57BL/6小鼠来源的MC38细胞接种7 d后，在hKDR^+/+/Rag1 ^-/-、 Rag1 ^-/-、C57BL/6N 和 hKDR^+/+四组小鼠体内均可见肿瘤生长。BALB/c 小鼠来源的 CT26 细胞接种 10 d 后，仅在 hKDR^+/+/Rag1 ^-/-和 Rag1 ^-/-小鼠体内见到肿瘤生长，在 C57BL/6N 及 hKDR^+/+小鼠中均未见肿瘤生长；接种后 3 周， hKDR^+/+ /Rag1 ^-/-小鼠的成瘤体积明显大于Rag1 ^-/-小鼠 （P<0.01）。

结论 获得了Rag1基因敲除小鼠，并进一步筛选获 得新型hKDR^+/+/Rag1 ^-/-双靶点基因修饰小鼠模型；Rag1基因缺失时，不同品系小鼠来源的肿瘤细胞系更易成瘤。这 提示可以通过降低hKDR^+/+人源化小鼠的免疫反应能力，增强或扩大该模型小鼠接纳肿瘤细胞系的范围，构建多种 可用于评价VEGFR靶点药物的荷瘤小鼠模型。

阅读原文：hKDR+╱+人源化及Rag1-╱-基因缺陷新型双靶点遗传修饰荷瘤小鼠模型的建立.pdf