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模型制备

免疫介导血虚证动物模型

2023年06月05日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)复制方法  成年BA1B/c、DBN/2小鼠。取DBN/2小鼠,断颈处死,95%乙醇浸泡消毒后,无菌条件下取出胸腺及颈、腋下、腹股沟淋巴结,加RPMI-1640培养液,除去表面血污及黏附的结缔组织后,制成单细胞悬液,计数配成1×1000000/ml的浓度,其胸腺细胞:淋巴结细胞为1:2,并鉴定细胞活性在95%以上。BALB/c小鼠经X射线6.0Gy 3min亚致死剂量照射后1~4h内,立即经尾静脉输入上述细胞悬液,每只小鼠输入0.2ml。10d后,处死动物,取股骨骨髓,制备骨髓细胞悬液,体外培养红系造血祖细胞、粒单系祖细胞,染色、计数。

(2)模型特点  动物骨髓细胞体外培养骨髓红系祖细胞(CFU-E,BFU-E)、粒单系祖细胞(CFU-GM)明显下降。模型小鼠在11~14d表现为皮毛枯槁、唇色眼睑苍白、拱背消瘦等中医血虚证临床特点,以及全血细胞减少、骨髓有核细胞下降等“髓不生血”的病理特点。

(3)比较医学  免疫介导型再障小鼠模型机制在于 BALB/c小鼠经亚致死量照射后,机体的免疫功能严重受损,再输入同基因H-2,但Mls抗原不同的DBN2小鼠的胸腺、淋巴结混合细胞,这些免疫活性细胞得以在宿主体内生存,并通过某种未明的机制,使宿主体内出现造血抑制细胞和血浆CFU-GM抑制活性,从而导致造血干细胞数量明显减少并出现缺陷,使自身复制的速率低于分化率,最终引起全血细胞减少。


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