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模型制备

系统性红斑狼疮诱发模型

2023年06月25日 浏览量: 评论(0) 来源:《常见和新发传染病动物模型》 作者:张连峰 秦川 主编 责任编辑:yjcadmin

1.药物狼疮模型  常用一种在矿物油中高浓度富集的异戊间二烯型链烷烃——降植烷(pristane),且腹腔注射降植烷是得到富集单克隆抗体腹水的一种标准方法。降植烷用于 BALB/c小鼠可引起狼疮特征性的自身抗体,如:抗RNP抗体、抗DNA和抗组蛋白抗体,抗体水平与MRL/lpr小鼠模型的相当。降植烷应用后同样发现小鼠肾有免疫复合物的沉积,并且直接导致严重的蛋白尿和肾炎。除了BALB/c小鼠,其他各种小鼠也都不同程度地对降植烷敏感。在性别差异上,降植烷引起的雌性狼疮模型要比雄性严重,至少在SJL/J品系的小鼠上是这样的。可用降植烷单次腹腔注射0.5ml诱发BALB/c小鼠系统性红斑狼疮模型。

2.淋巴细胞免疫模型  慢性移植物抗宿主疾病模型更为常用(cGVHD),通过将亲代 DBA鼠的淋巴细胞输注到杂交鼠(C57BL6和DBA)的F1代上即可建立cGVHD模型。它的特点是:移植物CD4+介导的反应导致宿主B细胞活化、多克隆增殖及产生免疫球蛋白。这个慢性疾病模型的一些表现与SLE相似,包括ANA,狼疮特异性自身抗体和免疫复合物介导的肾炎。该模型的另一个特点是雌性表型较雄性重,这可用来做狼疮发病性别的差异研究。

国内的董等用上述方法成功建立了鼠狼疮样肾炎模型。方法为:先将F1代杂交鼠随机分为2组。在无菌条件下,取出亲代DBA鼠的脾、淋巴结和胸腺,剪碎,玻片研磨,PBS冲洗过筛,过筛后细胞悬液按1:1比例沿离线管壁缓慢加入鼠淋巴细胞分离液上,1800转/分离心20分钟,吸出淋巴细胞层,用PBS稀释洗涤3次,第1次1800转/分,10min,以后均1800转/分,5min,最后用PBS制备成适量、混匀的淋巴细胞悬液。细胞活力用台盼蓝拒染试验和位相显微镜观察测定,活细胞至少90%以上。细胞总数用流式细胞仪测定。模型组于第0、3d、7d和10d,进行受体鼠尾静脉注射淋巴细胞悬液,每次注射0.25ml,含50×1000 000个受体活细胞。对照组每次注射等量的PBS。


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