基于线粒体质量控制系统观察六味地黄丸对老龄小鼠的神经保护作用
目的 观察六味地黄丸对老龄小鼠海马区线粒体质量控制系统的影响及神经保护机制。
方法 将 50 只 20 月龄 C57BL/ 6J 老龄小鼠按照每组 10 只进行随机分组,包括模型组,六味地黄丸低、中、高剂量组,多奈哌 齐组,另选 10 只 3 月龄 C57BL/ 6J 野生小鼠为正常组。 各组给药 60 d 后,进行行为学实验,免疫荧光检测胶质纤维 酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)的表达,透射电镜观察线 粒体的健康程度及自噬小体的数量,Western blot 检测线粒体质量控制系统相关蛋白。
结果 高剂量组与模型组比 较,行为学实验结果显示六味地黄丸可以提高小鼠的学习记忆能力,增强运动能力,减轻焦虑;免疫荧光实验显示 GFAP、TNF-α 表达下降,电镜观察发现正常线粒体数量增多;Western blot 实验结果显示 PTEN 诱导激酶 1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、帕金蛋白(PARKIN)、自噬相关 3 号染色体基因(autophagy related 3,ATG3)、自噬 相关 7 号染色体基因( autophagy related 7,ATG7)、微管相关蛋白 1 轻链 3B( microtubule-associated protein 1 light chain 3β,LC3B)、线粒体融合蛋白 2(mitochondrial fusion protein 2,MFN2)、线粒体内源发动蛋白 1( optic atrophy 1, OPA1)、线粒体转录因子 A( recombinant transcription factor A, mitochondrial,TFAM)、γ 共激活因子-1α( peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator 1α,PGC-1α) 蛋白的表达上升,泛肽结合蛋白 1( sequestosome protein 1, P62)、线粒体动力相关蛋白 1(dynamin-related protein 1,DRP1)、TNF-α 蛋白的表达下降。
结论 六味地黄丸可以 提高小鼠的认知学习能力,减轻小鼠海马区的神经炎症,改善线粒体质量控制系统。
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