外源性八肽胆囊收缩素对谷氨酸诱导大鼠大脑皮层神经元凋亡的保护作用研究
目的 探讨外源性八肽胆囊收缩素(CCK-8)对谷氨酸诱导体外大鼠大脑皮层神经元损伤模型中神 经细胞凋亡的保护作用及其可能作用机制。
方法 不同浓度 CCK-8 处理体外培养的大鼠大脑皮层神经元,MTT 法 检测细胞存活情况并筛选合适浓度。 培养大鼠大脑皮层神经细胞并用谷氨酸(Glu)处理建立神经元损伤模型,分 为模型组、CCK-8 组,另设对照组。 采用流式细胞术检测细胞周期与凋亡率;Flou-4 实验检测各组细胞 Ca 2+水平;实 时定量 PCR 法检测 B 细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)、Bcl-2 相关蛋白(Bax) mRNA 表达情况;Western blot 检测 Bcl-2、 Bax、cleaved caspase-3 蛋白表达情况。
结果 与对照组比较,模型组神经元细胞存活率、G1 期细胞分布比例、Bcl-2 mRNA 和蛋白表达水平降低,S 期、G2 / M 期细胞分布比例、细胞凋亡率、Ca 2+水平、Bax 和 cleaved caspase-3 蛋白表达 水平升高(P<0. 05)。 与模型组比较,CCK-8 组神经元细胞存活率、G1 期细胞分布比例、Bcl-2 mRNA 和蛋白表达水 平升高,S 期、G2 / M 期细胞分布比例、细胞凋亡率、Ca 2+水平、Bax 和 cleaved caspase-3 蛋白表达水平降低(P<0. 05)。
结论 CCK-8 对谷氨酸诱导的神经元细胞凋亡有一定的抑制作用,可能是通过抑制钙离子内流,调节细胞内 Bax / Bcl-2 表达水平发挥作用。
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