目的 探讨甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)损伤不同类型神经细胞双链 DNA 的情况。

方法 体外实验,分别培养原代皮质神经元、HT-22 细胞、BV2 细胞、HMC3 细胞和 U-87 MG 细胞,分别给予 METH 后,观察 细胞形态和用 Western blot 检测各组细胞表达 γ-H2AX 的水平。 体内实验,建立 METH 腹腔注射小鼠模型,应用旷 场实验进行小鼠行为学分析。 HE 染色观察小鼠前额叶皮质和海马内神经细胞的形态变化,用 IF 观察两个脑区内 双链 DNA 损伤情况,用 Western blot 检测两个脑区表达 γ-H2AX 的水平。

结果 体外实验,给予 METH 后,原代皮 质神经元、HT-22 细胞、BV2 细胞、HMC3 细胞和 U-87 MG 细胞形态发生明显变化,细胞突触变短或消失,胞体皱缩, 间隙增宽。 各组细胞表达 γ-H2AX 水平明显升高。 体内实验,给予 METH 后,与生理盐水组相比,小鼠运动极其活 跃,运动轨迹和路程明显增加。 HE 染色结果显示前额叶皮质和海马内神经元明显水肿,嗜酸性增强,部分神经元 变性改变。 IF 结果显示,与生理盐水组相比,METH 组前额叶皮质和海马内神经细胞发生双链 DNA 损伤的数量明 显增多,且荧光强度明显增强。 Western blot 结果显示,与生理盐水组相比,METH 组前额叶皮质和海马组织表达 γ- H2AX 水平明显升高。

结论 METH 可损伤神经系统双链 DNA。 METH 可诱导原代皮质神经元、HT-22 细胞,BV2 细胞、HMC3 细胞和 U-87 MG 细胞以及小鼠前额叶皮质和海马组织表达 γ-H2AX 水平明显增高。 该研究可为阐明 METH 诱导神经毒性作用机制提供理论依据。

阅读原文：甲基苯丙胺损伤神经系统双链DNA的作用研究.pdf