目的 探讨甘松新酮(nardosinone, Nar)通过调控 PI3K/ Akt / mTOR 通路对低氧诱导 H9c2 心肌细胞 凋亡的影响及机制。

方法 采用氯化钴( CoCl ₂ ) 制备心肌细胞低氧损伤模型,CCK-8 试剂盒检测细胞活性; Hoechst 33342 进行细胞染色,激光共聚焦显微镜下观察细胞凋亡现象;网络药理学预测 Nar 治疗 IHD 相关信号通 路;Western blot 检测凋亡、自噬和 PI3K/ Akt / mTOR 通路相关蛋白表达。

结果 PI3K/ Akt / mTOR 通路是 Nar 治疗 IHD 关键信号通路之一;与对照组比,CoCl ₂ ( 400 μmol / L) 组细胞活性降低,细胞核碎片增多,凋亡蛋白 CleavedCaspase-3 表达升高、Bcl-2/ Bax 比降低,PI3K、Akt 和 mTOR 磷酸化水平降低;P62 表达降低,LC3II/ LC3I 比和 Beclin- 1 表达升高(P<0. 05)。 与 CoCl ₂ 组比,Nar(50 μmol / L)预处理显著增加了细胞活性、减少细胞核凋亡碎片,降低 Cleaved-Caspase-3 表达,升高 Bcl-2/ Bax 比值,增加了 PI3K、Akt 和 mTOR 磷酸化水平及 P62 表达,降低 LC3II/ LC3I 比和 Beclin-1 表达(P<0. 05)。 PI3K 特异性抑制剂 LY294002 预作用后抵消了 Nar 对 CoCl ₂ 引起的以上凋亡、PI3K/ Akt / mTOR 通路相关蛋白和 P62 蛋白的影响,但没有抵消对 LC3II/ LC3I 比和 Beclin-1 表达的影响。

结论 Nar 激 活 PI3K/ Akt / mTOR 通路抑制了 CoCl ₂ 诱导的 H9c2 心肌细胞低氧凋亡,但可能通过其他途径缓解了过度自噬对细 胞造成的损伤。

阅读原文：基于PI3K╱Akt╱mTOR通路探讨甘松新酮对H9c2心肌细胞低氧损伤的保护作用.pdf