目的 观察不同浓度黄芪多糖( Astragalus polysaccharides, APS) 通过干预肺转移前微环境( Premetastatic niche, PMNs)对 HIF-1 和 S100A8 / A9 蛋白的影响,初步阐明 APS 对肺 PMNs 中的作用靶点及对肿瘤肺转 移影响的分子机制。

方法 SPF 级 C57BL/ 6J 小鼠 90 只,除空白组外,其余 75 只用荧光素酶(LUC)标记的 Lewis 肺癌细胞 1 × 10 ⁶ 个通过小鼠尾静脉注射构建 PMNs 模型,并随机分成 5 组:模型组、低剂量组(灌服黄芪多糖 50 mg / kg)、中剂量组(灌服黄芪多糖 100 mg / kg)、高剂量组(灌服黄芪多糖 200 mg / kg)、芬戈莫德(FTY720)组(腹腔 注射 FTY720 1 mg / kg),每组 15 只。 观察不同浓度黄芪多糖对 PMNs 中 HIF-1 和 S100A8 / A9 蛋白的影响,同时用 小动物活体成像及 HE 染色评估肺部转移情况。 接种瘤细胞次日后低、中、高各剂量组按剂量灌胃给药,每天 1 次, 共 28 d。 FTY720 通过腹腔注射每 2 d 1 次间隔给药。 在前 14 d 通过小动物活体成像动态观察肺肿瘤转移情况,并 在第 14 天每组随机取出 5 只采用 Western Blot 及 RT-qPCR 技术检测多功能蛋白聚糖、纤维连接蛋白和赖氨酰氧化 酶等在肿瘤转移前微环境中具有标志性的蛋白进一步验证模型成功。 在第 28 天取肺组织采用苏木精-伊红(HE) 染色观察小鼠肺组织病理学改变,并采用 Western Blot 及 RT-qPCR 技术检测 28 d 所取的肺组织中 HIF-1 和 S100A8 / A9 蛋白和基因的表达,取材前 12 h 禁食不禁水。

结果 HE 染色观察小鼠肺组织发现,与空白组相比模型 组小鼠肺组织中出现大面积肺泡壁增厚和粒细胞浸润,并出现少量肿瘤转移灶;与模型组相比,高剂量组和 FTY720 组小鼠的肿瘤转移灶点明显减少,肺组织趋于正常。 RT-qPCR、Western Blot 检测结果显示:与空白组比较, 模型组小鼠肺中 HIF-1,S100A8,S100A9 基因和蛋白表达显著升高(P < 0. 05);而与模型组相比,FTY720 组和 APS 各组上述蛋白和基因表达均下降(P < 0. 05)。

结论 黄芪多糖可通过调控肺肿瘤转移前微环境中 HIF-1、S100A8、 S100A9 的表达水平减少肿瘤细胞肺转移。

阅读原文：黄芪多糖对肺肿瘤转移前微环境中HIF-1和S100A8╱A9蛋白表达及肺转移的影响.pdf