BALB/cA.Cg.SHJHhr小鼠的培育及其相关遗传学特性分析
目的 将自发突变培育的SHJHhr 小鼠的突变Hr基因导入到遗传背景清晰的BALB/cAShjh近交系小鼠,通 过突变基因筛查和遗传学特性分析为后续研究Hr基因突变导致异常表型的分子机制以及该模型的推广应用提供依 据。
方法 采用在表型监测指导下回交-互交的育种方法,将自发突变培育的SHJHhr 小鼠的突变基因以同源突变导 入方式导入到近交系BALB/cAShjh小鼠,经10代后培育成BALB/cA.Cg.SHJHhr (简称C.Cg.SHJHhr ) 小鼠。通过多 重 PCR 建库后二代测序的方法,分析 C.Cg.SHJHhr 小鼠中随机分布于基因组上的 90 个单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphism,SNP) 检测位点基因型。然后按照GB/T 14927.1—2008的方法,对C.Cg.SHJHhr 小鼠中 14个生化位点标记基因进行检测。最后利用全基因组外显子测序技术,检测该小鼠的突变基因。
结果 自2018年5 月至2022年3月,共进行了10代的回交-互交,完成了C.Cg.SHJHhr 小鼠品系的构建。在检测的90个SNP位点中, 除了rs13484115、rs13484116两个位点不同外,C.Cg.SHJHhr 小鼠的其他位点基因型均与受体小鼠BALB/cAShjh相 同;生化位点标记基因检测结果显示,C.Cg.SHJHhr 小鼠的14个位点全部与受体小鼠相同;全基因组外显子测序发 现,该小鼠相比受体小鼠品系存在109个位点突变,包括同义突变71个,终止密码子增加1个,错义突变37个,涉 及蛋白质序列改变的基因20个 (包括已报告的Hr基因)。
结论 成功培育了突变导入系C.Cg.SHJHhr 小鼠,通过全 基因组外显子测序分析发现了3个主要引起表型变异的Hr突变基因及关联突变基因,为该小鼠在生物医学研究中的 拓展应用提供了基础数据。
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