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可评价注射式再生支架修复效果的小鼠骨缺损模型的构建研究
目的 建立小鼠股骨缺损模型并探索甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)对缺损后骨再 生的影响。
方法 将 40 只 8 周龄的雌性 C57BL/ 6N 小鼠随机分成 4 组:骨缺损组( n = 10),5% GelMA 组( n = 10),10% GelMA 组( n = 10),15% GelMA 组( n = 10)。 造模 2 周后,使用 HE 染色观察股骨组织结构;使用 Masson 染色观察股骨胶原纤维形态;使用 OCN 免疫组化染色分析骨特异性蛋白表达水平。
结果 GelMA 具有良 好的可注射性,可经 PCR Pipettes 移液器注入骨缺损区。 HE 染色结果表明 10% GelMA 组相较于骨缺损组、5% GelMA 组和 15% GelMA 组具有更好的骨修复效果,缺损部位组织结构更加完整;Masson 染色结果表明 10% GelMA 组有更多成骨相关的胶原纤维形成;RT⁃qPCR 分析显示,10% GelMA 组小鼠骨缺损部位 OCN 表达显著高于骨缺损 组(P < 0.001)、5% GelMA 组(P < 0.01)和 15% GelMA 组(P < 0.01)。 10% GelMA 组小鼠骨缺损部位 Osterix 表 达显著高于骨缺损组(P < 0.001)、5% GelMA 组(P < 0.001)和 15% GelMA 组(P < 0.01);OCN 免疫组化染色结 果表明 10% GelMA 组的修复区骨特异性蛋白表达显著高于骨缺损组(P < 0.01)、5% GelMA 组(P < 0.01)和 15% GelMA 组(P < 0.05)。
结论 构建了可评价注射式再生支架修复效果的小鼠骨缺损模型,并应用于基于 GelMA 的 可注射再生支架筛选和治疗效果评价,为开展相关领域工作提供实验基础。
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