目的 探究METTL3(methyltransferase like 3,METTL3)介导的 m6A(N6 甲基腺苷)修饰对氧化低密 度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264. 7)焦亡的影响。

方法 ox-LDL(50 μg / mL)诱导 RAW264. 7 细胞 24 h 后,对 METTL3 进行敲低或过表达,检测培养细胞 RNA m6A 甲基化水平,荧光定量 PCR 和 Western blot 法检测 METTL3 和细胞焦亡相关基因 NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、 Caspase-1 mRNA 和蛋白表达水平,乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测细胞死亡率,酶联免疫吸附法检测炎症细胞因 子 IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α 和 IL-10 的含量。

结果 ox-LDL 能够促进 RAW264. 7 巨噬细胞 METTL3 的表达和 RNA m6A 甲基化水平,同时也能促进炎症因子 IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α 的分泌(P<0. 05),降低 IL-10(P<0. 05)的表达。 在 ox-LDL 诱导基础上,METTL3 过表达后,RNA m6A 甲基化水平升高,NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、Caspase-1 表 达显著增加,促炎细胞因子 IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18 水平升高,抗炎细胞因子 IL-10 水平降低,LDH 释放增加, METTL3 敲低后结果相反。

结论 METTL3 介导的 m6A 修饰能够显著促进 ox-LDL 诱导的巨噬细胞焦亡和炎症 反应。

阅读原文：METTL3介导的m6A修饰对ox-LDL诱导的巨噬细胞焦亡的影响.pdf