目的 建立一种改良的小鼠精原细胞染色体畸变试验方法,以获得大量结构清晰的中期分裂相精 原细胞利于阅片,并将改进后的方法应用于玛咖的致突变实验。

方法 选取雄性 ICR 小鼠 30 只,随机分为 6 组, 每组 5 只,将原染色体制备方法增加了剪碎曲细精管及精原细胞消化富集,采用 1. 5 mg / mL 的胶原酶,35℃消化 15 min,每隔 3 min 搅拌 1 次,消化富集精原细胞,经低渗、固定、滴片,封片后镜检阅片,同时与国标方法所制备的滴片 进行比较阅片。

结果 改良消化富集法所制备的滴片背景清晰,染色体分散良好,收缩适中,易于观察。 分析每只 动物 100 个中期分裂相精原细胞所需观察的高倍视野数( 25± 3. 9) 与国标方法组( 75± 5. 6) 比较明显减少(P< 0. 01),精原细胞有丝分裂指数(18. 04±2. 47)与国标方法组(8. 83±2. 04)比较明显增加(P<0. 01);环磷酰胺处理 组染色体畸变率(15. 40±2. 30)与空白对照组(3. 60±1. 14)比较显著增加(P<0. 01);玛咖各剂量组染色体畸变率与 空白对照组比较无统计学意义(P>0. 05)。

结论 改良消化富集法能明显提高精原细胞富集效率及实验成功率, 可获得大量分散良好、背景清晰的中期分裂相精原细胞,明显优于国标方法;在本次实验条件下,玛咖对小鼠精原 细胞染色体无致突变作用。

阅读原文：改良消化富集法提高小鼠精原细胞染色体制备效率的研究及应用.pdf