目的 基于 ＬＢＰ 敲除小鼠（Ｌｂｐ ^{－ ／ －} ）原代肝细胞探讨 ＬＢＰ 缺失后 Ａｇｔｒ１ａ 调节 ＬＰＳ 诱导炎症的作用。

方法 通过两步灌流法提取 ＷＴ 组、Ｌｂｐ ^{－ ／ －}组小鼠原代肝细胞，构建 ＬＰＳ 诱导的原代肝细胞炎症模型；分别采取加 入抑制剂氯沙坦、转染 ｓｉＲＮＡ 两种方法抑制 Ｌｂｐ ^{－ ／ －}小鼠原代肝细胞 Ａｇｔｒ１ａ 表达；抑制剂法将细胞分为对照组 Ａ（空 白对照）、ＬＰＳ 组 Ａ（ＬＰＳ 刺激）、抑制剂氯沙坦组（氯沙坦干预 ３ ｈ 后加入 ＬＰＳ 刺激），转染 ｓｉＲＮＡ 法将细胞分为对 照组 Ｂ（空白对照）、ＬＰＳ 组 Ｂ（ＬＰＳ 刺激）、阴性对照组（ ｓｉ⁃ＮＣ 干扰 １２ ｈ 后加入 ＬＰＳ 刺激）、干扰组（ ｓｉ⁃ａｇｔｒ１ａ 干扰 １２ ｈ 后加入 ＬＰＳ 刺激）；ＷＴ 组小鼠原代肝细胞则分为对照组（空白对照）、ＬＰＳ 组（ ＬＰＳ 刺激）。 本研究利用 Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ 验证 Ｌｂｐ ^{－ ／ －}小鼠原代肝细胞中 ＬＢＰ 蛋白敲除情况，从 ＷＴ 组、Ｌｂｐ ^{－ ／ －}组小鼠原代肝细胞的 Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ 方面验证 Ａｇｔｒ１ａ 在 ＬＰＳ 刺激下的变化情况，使用 ＣＣＫ８、ｑＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ 等方法探讨抑制剂氯沙坦及 ｓｉ⁃ａｇｔｒ１ａ 对 Ｌｂｐ ^{－ ／ －}小鼠原代肝细胞炎症的抑制情况。

结果 Ｌｂｐ ^{－ ／ －}小鼠原代肝细胞中 ＬＢＰ 蛋白已敲除完全；与 ＷＴ 组相比，在 ＬＰＳ 诱导下 Ｌｂｐ ^{－ ／ －}小鼠原代肝细胞 Ａｇｔｒ１ａ 表达显著升高（Ｐ ＜ ０.００１）；抑制剂组细胞存活率显著升高（Ｐ ＜ ０.０１）； 抑制剂组以及干扰组的炎症因子表达显著降低（Ｐ ＜ ０.０１），同时与炎症相关蛋白 ｐ⁃ＥＲＫ 的表达也显著降低（Ｐ ＜ ０.０１）。

结论 ＬＰＳ 刺激 Ｌｂｐ ^{－ ／ －}小鼠原代肝细胞后 Ａｇｔｒ１ａ 表达上调能够代偿脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）的作用来促进 炎症的发生，抑制 Ａｇｔｒ１ａ 表达能显著降低 ＬＰＳ 诱导的 Ｌｂｐ ^{－ ／ －}小鼠原代肝细胞炎症反应。

阅读原文：Ａｇｔｒ１ａ调节ＬＰＳ诱导的Ｌｂｐ－╱－小鼠原代肝细胞炎症.pdf