科普知识
Cre工具鼠、Dre工具鼠等种类介绍
前段时间，赛业云课堂开展了「Cre工具鼠系统在实际应用场景中的问题与思考」主题课程，有小伙伴在听课过程中提到了一个问题：“什么是雌激素诱导型Cre，CreER、CreERT、CreERT2和MerCreMer有什么区别？”
这里涉及到了为大家所熟知的CreERT2，其配体结合区包含3个点突变的Cre-ERT2（C400V/M453A/L544A），相较于CreERT，CreERT2在体内对于药物诱导的敏感性更高。百闻不如一见，我们工具鼠专栏近期就上新了许多CreERT2小鼠，不妨一起来看看吧！
将Cyp19a1-IRES-Cre小鼠与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，产生双基因杂合子代小鼠，Cre酶介导的重组将导致tdTomato蛋白在子代Cre阳性细胞中表达。分别采集6周龄子代小鼠的卵巢、睾丸和脑组织，通过免疫荧光染色观察Cre重组酶的表达情况。其基因型为——实验组（Cre+）：Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]；对照组（Cre-）：Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]。
Cre重组酶在雌性生殖腺中的表达情况
图1 雌性小鼠卵巢免疫荧光染色[1]
Cre+（Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）雌性小鼠在卵巢颗粒细胞中存在大量的tdTomato蛋白红色荧光，表明在该部位存在大量的Cre重组酶表达，而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。
Cre重组酶在雄性生殖腺中的表达情况
图2 雄性小鼠睾丸免疫荧光染色[1]
Cre+（Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）雄性小鼠在少量睾丸细胞中存在红色荧光，其定位与DAPI部分重合，表明这些细胞可能为睾丸支持细胞或其他类型细胞；而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。
Cre重组酶在脑海马区的表达情况
图3 脑部海马区免疫荧光染色[1]
Cre+（Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠在海马CA区域结构（图中白色框内位置）中存在部分的红色荧光，显示在此类区域中Cre发生重组；而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。（海马CA区：Hippocamp formation-CA，包括CA1和CA2）
Cre重组酶在脑室、纤维束和脑核区域的表达情况
图4 脑室、纤维束和脑核免疫荧光染色[1]
Cre+（Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠在侧脑室、终纹、尾壳核结构中存在部分的红色荧光，显示在此类区域中Cre发生重组；而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。（纤维束区域：终纹-Stria terminalis，图中左侧箭头所示部位；脑室区域：脑侧脑室-Lateral ventricle，图中中间箭头所示部位；脑核区域：尾壳核-Caudoputamen，图中右侧箭头所示部位）
总结
Cyp19a1-IRES-Cre小鼠模型中Cre重组酶的表达主要定位于卵巢颗粒细胞中，同时也可以在脑部的海马区、脑室、纤维束和脑核中的部分细胞中发生由Cre重组酶介导的重组，Cre重组酶的表达与小鼠内源性Cyp19a1基因的表达模式相似，具有良好的特异性。
相关推荐
嫌flox与Cre的配繁过程太复杂？不如一步到位订购条件性敲除（CKO）小鼠！现在订购“找小鼠，上红鼠”小鼠资源库KO/CKO现货小鼠，即可获赠精美礼品，超20种研究领域，快至48小时发货。快来点击下方图片，咨询您所需的小鼠吧
