目的 构建基于ΦC31整合酶和载体质粒pUASTattB的果蝇转基因系统的阴性对照品系，为转基因果蝇研 究实验提供更科学的阴性对照。

方法 用显微注射法将载体质粒pUASTattB （可携带目的基因完成定点插入的常用 载体质粒） 转入携带ΦC31整合酶的4种不同遗传背景的果蝇品系attP-25C6、attP-68A4、attP-75B1和attP-86F8 胚胎中，培养获得G0代成虫后将每只G0代成虫分别与平衡子果蝇品系ywR13S做单管杂交 （每管中G0代成虫1只 与ywR13S 3只进行杂交），通过观察G1代果蝇的复眼颜色，判断是否有mini-White插入，计算成功插入的概率。 再选取成功插入mini-White的G1代果蝇成虫与3种平衡子果蝇品系DB、ywR13S和yw122分别做单管杂交 （1只G1 代雄果蝇与3只平衡子品系处女蝇杂交），平衡保种。提取保种好的果蝇品系基因组DNA，用PCR法鉴定载体质粒 pUASTattB转入情况。

结果 4种不同遗传背景的果蝇成功显微转入pUASTattB质粒后，再用3种平衡子果蝇品系 进行平衡保种，得到 12 株果蝇品系，均为携带 mini-White 标记的红眼果蝇，PCR 鉴定表明有 pUASTattB 序列 插入。

结论 12株转基因果蝇品系可基本满足以pUASTattB为载体构建的转基因果蝇研究实验的阴性对照需求， 丰富了国家果蝇资源中心的果蝇资源。

阅读原文：基于ΦC31整合酶和载体质粒pUASTattB的12株果蝇转基因阴性对照品系的建立.pdf