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骨髓骨片法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞和PKH26标记

2023年12月07日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志2023年第10期 作者:陈爽 谢燕燕 徐菊菊 闫振宇 责任编辑:lascn
摘要:旨在建立一种高效的方法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞的方法,并应用 PKH26 进行体外标记,探讨 PKH26 标记对 BMSCs 生物学特性的影响,以及体外示踪 情况。

目的 旨在建立一种高效的方法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的方法,并应用 PKH26 进行体外标记,探讨 PKH26 标记对 BMSCs 生物学特性的影响,以及体外示踪 情况。

方法 将大鼠 5 d 乳鼠双后肢骨进行分离,去除周围的肌肉和筋膜,并将其剪成小块进行培养,利用换液、传 代提纯 BMSCs,应用流式细胞仪测定第 3 代细胞表面抗原。 在培养条件相同的情况下,取第 3 代 BMSCs 应用 PKH26 进行标记,标记组与未标记组在荧光显微镜下对细胞形态学、增殖状态进行观察,比较标记组与未标记组成 骨成脂诱导特点及鉴定。

结果 骨髓骨片法分离乳鼠双后肢骨,培养 BMSCs 呈细长梭形,形态均一,短时间内可迅 速获得大量 BMSCs;经流式细胞仪鉴定结果表明,表达 CD29 为(91 18±1 29)%,表达 CD90 为(95 04±0 11)%,表 达 CD45 为(1 74±0 36)%;PHK26 标记对 BMSCs 细胞形态,增殖无明显影响(P>0 05),对成骨成脂诱导无影响。

结论 采用大鼠 5 d 乳鼠骨髓骨片法能够快速培养出大量高纯度的 BMSCs,该细胞可作为种子细胞用于骨组织工 程;PKH26 可对体外大鼠 BMSCs 进行标记。

阅读原文:骨髓骨片法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞和PKH26标记.pdf

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