目的 探讨组蛋白去乙酰化酶 ６（ ｈｉｓｔｏｎｅ ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅｓ ６，ＨＤＡＣ６）特异性小分子抑制剂 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 对糖尿病肾病（ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ＤＮ）小鼠肾损伤的保护作用和机制。

方法 Ｃ５７ＢＬ／ ６Ｊ 小鼠随机分为 ３ 组：对 照组、ＤＮ 组和 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 组。 ＤＮ 组和 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 组行包膜下肾切除术以切除右肾，并通过腹膜内注射 ＳＴＺ 诱 导 ＤＮ。 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 组接受 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 治疗，每 ３ ｄ １ 次，连续治疗 ８ 周。 ＲＮＡ 测序分析 ＤＮ 组和 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 组 肾组织中差异表达基因。 通过透射电子显微镜评估线粒体受损情况，以及 ＤＨＥ 染色估计肾组织中的活性氧 （ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）水平。 将小鼠肾小球内皮细胞（ｍｉｃｅ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ，ｍＧＥＣ）暴露于高葡萄 糖（ｈｉｇｈ ｇｌｕｃｏｓｅ，ＨＧ）培养基或 ４０ ｍｍｏｌ ／ Ｌ 甘露醇（对照），加入或不加入 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 处理。 采用蛋白质印迹分析 ＨＤＡＣ６、肾损伤标志物 ＫＩＭ１ 和上皮细胞－间充质转化（ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ⁃ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ，ＥＭＴ）标志物的表达情况， 以及流式细胞仪检测细胞中线粒体 ＲＯＳ 和细胞凋亡情况。

结果 ＤＮ 小鼠肾组织和暴露于 ＨＧ 的 ｍＧＥＣ 细胞中 ＨＤＡＣ６ 表达上调，并与 ＫＩＭ１ 水平升高一致。 组织学分析显示 ＤＮ 小鼠的显著形态学变化，包括肾小球肥大、肾小 球系膜基质积聚、肾小球基底膜增厚、肾小管基底膜增厚和出现肾小球、肾小管间质纤维化；Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 治疗缓解 了这些不良改变。 与对照 ＤＭＳＯ 相比，Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 在 ＨＧ 处理下显著降低了 ｍＧＥＣ 细胞中肾损伤分子 １（ ｋｉｄｎｅｙ ｉｎｊｕｒｙ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ１，ＫＩＭ１）、ＨＤＡＣ６、α 平滑肌肌动蛋白（α⁃ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ａｃｔｉｎ，α⁃ＳＭＡ）、Ｎ⁃钙粘蛋白、波形蛋白表达（Ｐ ＜０ ０５），并上调 Ｅ－钙粘蛋白表达（Ｐ＜０ ０５）。 透射电子显微镜显示 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 组小鼠的肾小球内皮细胞受损线 粒体的比例较 ＤＮ 组显著降低（Ｐ＜０ ０１）。 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 组小鼠肾组织中 ＲＯＳ 水平较 ＤＮ 组降低（Ｐ＜０ ０１）。 ＲＮＡ 测序结果表明，与 ＤＮ 组小鼠相比，Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 组小鼠肾组织中与 ＥＣＭ－受体相互作用和与三羧酸（ＴＣＡ）循环相关 的基因富集。 在 ｍＧＥＣ 细胞中，Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 处理下调了 ＨＧ 诱导的 ｍＧＥＣ 细胞中的线粒体 ＲＯＳ 水平（Ｐ＜０ ０１），以 及减少了细胞凋亡（Ｐ＜０ ０５）。

结论 Ｔｕｂａｓｔａｔｉｎ Ａ 改善了 ＨＧ 诱导的肾小球内皮细胞损伤和 ＤＮ 进展，其作用机制 与保护线粒体稳态和抑制 ＥＭＴ 发生相关。

阅读原文：ＨＤＡＣ６抑制剂通过保护肾小球内皮细胞线粒体稳态和ＥＭＴ改善糖尿病肾病.pdf