目的 探讨低氧诱导剂二氯化钴(CoCl 2 )调控 3T3-L1 脂肪细胞自噬活性从而改善脂肪细胞炎症反 应和胰岛素抵抗的机制。

方法 常规培养和诱导分化 3T3-L1 脂肪细胞成为成熟的脂肪细胞,CoCl 2 作为低氧诱导 剂在不同时间、不同浓度条件下干预成熟的脂肪细胞,确认 CoCl 2 干预脂肪细胞自噬活性的最佳时间和浓度,随后 根据此时间和浓度分组,分为 0 h(对照组)、12 h、24 h、48 h CoCl 2 处理组,收集细胞样本进行相关指标测定。 MTT 法评价各组细胞存活情况;Western blot 分析各组细胞 HIF-1α 及其下游蛋白葡萄糖转运蛋白 Glut-1、自噬相关蛋白 LC3-Ⅱ和 Beclin-1 的表达情况;免疫荧光法检测各组细胞的自噬水平;ELISA 法检测各组细胞上清液中炎症因子 TNF-α 和 IL-6 分泌情况。

结果 150 μmol / L CoCl 2 是调控 3T3-L1 脂肪细胞自噬水平的最佳干预浓度;150 μmol / L CoCl 2 干预成熟的脂肪细胞 24 h 时,自噬活性水平增高,细胞存活率无显著的减低,脂肪细胞中 HIF-1α、LC3-Ⅱ、 Beclin-1、Glut-1 蛋白的表达水平也显著升高,但炎症因子 TNF-α 和 IL-6 分泌水平无明显增加;48 h 时自噬水平减 低,细胞存活率出现显著减低,脂肪细胞中 HIF-1α、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Glut-1 蛋白的表达水平减低,炎症因子 TNF-α 和 IL-6 分泌水平出现增加趋势。

结论 150 μmol / L CoCl 2 可以调控脂肪细胞自噬水平增加,自噬水平的增加以依 赖 HIF-1α 的方式活化,从而使自噬发挥保护脂肪细胞的作用使其免受炎症损伤和改善脂肪细胞胰岛素抵抗。

阅读原文：基于HIF-1α╱自噬途径探讨二氯化钴调控3T3-L1脂肪细胞炎症反应及胰岛素抵抗的机制.pdf