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抑制线粒体内膜蛋白OMA1对Rot诱导帕金森病细胞模型凋亡的影响
目的 探究抑制线粒体内膜蛋白 OMA1( overlapping activity with m-AAA protease,OMA1)对鱼藤酮 (rotenone,Rot)诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的影响。
方法 体外培养 SH-SY5Y 细胞,使用 Rot(终 浓度为 0. 05、0. 1、0. 2、0. 3、0. 4 μmol / L)处理 SH-SY5Y 细胞 24 h,选择最佳浓度的 Rot(0. 2 μmol / L)开展后续实验。 实验分为对照组(细胞不经特殊处理)、PD 模型组(0. 2 μmol / L 的 Rot 处理细胞 24 h)、空载转染组(正常对照组基 础上转染 OMA1 siRNA 的阴性对照序列)、OMA1 siRNA 组( 0. 2 μmol / L 的 Rot 处理细胞 24 h 后转染 OMA1 siRNA)。 CCK-8 检测细胞生存率、倒置相差显微镜观察各组细胞形态学、Western blot 检测 OMA1 及凋亡相关蛋白 Caspase-3、Bax、Bcl-2 蛋白表达的变化、TUNEL 凋亡试剂盒检测细胞凋亡。
结果 与对照组相比,随着 Rot 浓度的 升高,SH-SY5Y 细胞生存率呈浓度依赖性降低(P<0. 05);与对照组相比,PD 模型组中 OMA1 的表达及凋亡蛋白 Caspase-3 表达升高,Bax / Bcl-2 值升高(P<0. 01);与 PD 模型组相比,OMA1 siRNA 组细胞形态学变化逐渐恢复、凋 亡蛋白 Caspase-3 表达降低、Bax / Bcl-2 值降低,TUNEL 凋亡染色提示凋亡减轻(P<0. 01)。
结论 抑制线粒体内膜 蛋白 OMA1 可以改善 Rot 诱导的 PD 细胞模型引起的凋亡,对神经元可能具有保护作用。
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