目的 分析长链非编码 RNA SNHG16( long non-coding RNA SNHG16,lncRNA SNHG16)通过调控微 小 RNA-570(miR-570)对肝癌细胞索拉非尼耐药的机制研究。

方法 采用实时荧光 RT-PCR 检测人体正常肝组 织、肝癌细胞组织中 HepG2、HepG2-R 细胞的 lncRNA SNHG16、miR-570 表达,并对 HepG2-R 细胞做转染,后分别记 为 HepG2-R+pcDNA 组、HepG2-R+pcDNA SNHG16 组、HepG2-R+anti-miR-NC 组、HepG2-R+anti-miR-570 组、HepG2- R+pcDNA SNHG16+miR-NC 组、HepG2-R+pcDNA SNHG16+miR-570 组,用于后续试验,且将 miR-NC、miR-570、siNC、si-SNHG16 用相同方式转染至 HepG2 细胞,分别记为 miRNC 组、miR-570 组、si-NC 组、si-SNHG16 组。 用 MTT 法、流式细胞仪、Transwell 试验检测细胞增殖、凋亡及侵袭,Western blot 法测定细胞 CyclinD1、P21、MMP-9、MMP-2 表达变化。

结果 与人体正常肝组织组相比,肝癌细胞组织组的 lncRNA SNHG16 表达升高,miR-570 表达下降(P <0. 05)。 与正常细胞 HepG2-P 组相比,HepG2-R 组的 lncRNA SNHG16 及 IC50 值提高,miR-570、HepG2-R 细胞在索 拉非尼浓度为 1、2、4、8、16 μmol / L 中的抑制水平下降(P< 0. 05)。 HepG2-R+pcDNA SNHG16 作为过表达组,其 lncRNA SNHG16 表达显著升高(P<0. 05),与 HepG2-R+pcDNA 组对比,HepG2-R+pcDNA SNHG16 组的迁移的细胞 个数及 CyclinD1、P21、MMP-9、MMP-2 的表达水平降低,抑制率、凋亡率及 P21 的表达水平上升( P< 0. 05)。 与 HepG2-R+anti-miR-NC 组相比,HepG2-R+anti-miR-570 组 miR-570 表达水平降低(P<0. 05),与 HepG2-R+anti-miRNC 组比较,HepG2-R+anti-miR-570 组 CyclinD1、MMP-9、MMP-2 表达水平降低,抑制率、凋亡率及 P21 的表达水平 升高(P<0. 05)。 双荧光素酶报告实验显示,与 miR-NC 组相比,miR-570 使 WT-SNHG16 荧光素酶活性降低(P< 0. 05),而对 MUT-SNHG16 荧光素酶活性影响较小(P>0. 05)。 过表达 lncRNA SNHG16 可使 HepG2-R 细胞中 miR- 570 表达下降(P<0. 05),与 HepG2-R+pcDNA SNHG16+miR-NC 组相比,HepG2-R+pcDNA SNHG16+miR-570 组迁移 的细胞个数及 CyclinD1、MMP-9、MMP-2 的表达水平升高,抑制率、凋亡率及 P21 的表达水平降低(P<0. 05)。

结论 lncRNA SNHG16 可调控 HepG2-R 肝癌细胞的耐药性,其机制与 lncRNA SNHG16 靶向调控 miR-570 有关,为临床治 疗肝癌细胞提供了新的靶点。

阅读原文：lncRNA SNHG16通过调控miR-570对肝癌细胞索拉非尼耐药的机制研究.pdf