目前患病人群较多的血友病类型集中于血友病A和血友病B，血友病A患者因F8(FVIII)基因突变而缺乏第8凝血因子（Factor VIII），血友病B则是因F9(FIX)基因突变而缺乏第9凝血因子（Factor IX）所致。F9基因编码维生素K依赖性的丝氨酸蛋白酶（IX因子），该因子在内源性凝血途径中起着关键作用。IX因子作为一种无活性的酶原在血液中循环，经XIa因子切除激活肽而转化为活性形式IXa。凝血因子IX在凝血级联反应中通过与Ca²⁺离子、膜磷脂和VIII因子的相互作用来激活因子X（图1），当VIII和IX因子水平≥正常值的50%时人体内可正常止血^[2]。F9基因缺失可导致IX因子不足的凝血障碍，引发伴X染色体隐性遗传的B型血友病。 

 凝血途径示意图^[2] 

血友病B的严重程度通常与血浆中IX因子的活性水平相关。轻度血友病患者（IX因子活性>5%，>0.05 IU/mL）不会出现自发性出血，但创伤或术后的出血量有所增加；中度血友病患者（IX因子活性为1%-5%，0.01-0.05 IU/mL）很少发生自发性出血，但即使是轻微外伤也会引起长时间出血；重度血友病患者（IX因子活性<1%，<0.01 IU/mL）会出现自发性出血、软组织或关节出血以及严重的皮下血肿^[3]。据美国疾病预防控制中心（CDC）统计，重度血友病患者占所有确诊血友病B患者的30%-40%^[4]。 

赛业生物利用基因编辑技术敲除了小鼠F9基因的1~8号外显子，构建了F9 KO（产品编号：C001509）小鼠模型。该模型出现了凝血功能障碍等血友病B相关表型，可用于研究人类血友病B的遗传机制和临床表型，助力治疗药物的开发、筛选和评价。 

(1)F9 KO小鼠F9 mRNA表达缺失

 F9 KO小鼠和野生型小鼠（WT）的F9 mRNA表达量检测 

RT-qPCR检测结果显示，F9 KO小鼠的肝脏和胆囊中均不存在F9 mRNA的表达，基因编辑模型构建成功。 

(2)F9 KO小鼠凝血四项指标的异常提示小鼠存在凝血功能障碍

 F9 KO小鼠和野生型小鼠（WT）的凝血四项指标 

结果显示，与野生型小鼠相比，F9 KO小鼠的活化部分凝血活酶时间（APTT）显著延长，说明小鼠出现凝血功能障碍，出血时间延长，与经典F9 KO疾病模型的表型相似^[5]。此外，F9 KO小鼠凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）和纤维蛋白原（FIB）与野生型小鼠相比无显著差异，符合临床血友病B患者凝血指标的变化特征^[6]。 

除血友病B外，赛业生物还开发了一系列针对血液疾病（特别是血液罕见病）的基因编辑模型，包含基因敲除、基因敲入、点突变等类型，同时，我们也可根据研究人员的需求进行定制或合作开发。