目的 探讨长链非编码 RNA(LncRNA)FGD5-AS1 对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡、迁移 和侵袭的影响与机制。

方法 利用在线数据库分析 FGD5-AS1 在 OSCC 中的表达。 以在滕州市中心人民医院口腔 科收集的 30 例 OSCC 患者的肿瘤组织、正常组织和体外培养的人口腔黏膜细胞(HOK)和 OSCC 细胞( SCC-9、HSC- 4、SCC-25、CAL-27)为研究对象,采用 qRT-PCR 法检测 FGD5-AS1 和 miR-129-5p 表达。 将 FGD5-AS1 表达最高的 CAL-27 细胞分成 Control 组、si-NC 组、si-FGD5-AS1 组、si-FGD5-AS1 +NC inhibitor 组和 si-FGD5-AS1 +miR-129-5p inhibitor 组,CCK-8 法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平;划痕愈合实验检测细胞 迁移能力;Transwell 小室检测细胞侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证 FGD5-AS1 与 miR-129-5p 的靶向关系; Western blot 检测高迁移率族蛋白 B1(HMGB1)蛋白表达。 构建体内异种移植瘤模型,并分为 sh-NC 组、sh-FGD5- AS1 组、miR-129-5p inhibitor 组和 sh-FGD5-AS1+miR-129-5p inhibitor 组,检测肿瘤体积和肿瘤;qRT-PCR 检测移植 瘤组织 FGD5-AS1、miR-129-5p 表达;免疫组化检测移植瘤组织 HMGB1、Ki67 表达。

结果 数据库分析显示,OSCC 肿瘤组织中 FGD5-AS1 的表达水平是正常组织的 4 倍,且 FGD5-AS1 表达与 OSCC 患者分级较差相关。 与正常组织 或人口腔黏膜细胞相比,肿瘤组织和 OSCC 细胞系中 FGD5-AS1 表达明显升高,miR-129-5p 表达明显降低( P< 0. 05),选择 FGD5-AS1 表达水平最高的 CAL-27 细胞进行转染实验。 沉默 FGD5-AS1 可升高细胞凋亡率,降低细胞 活力、划痕愈合率及侵袭细胞数,并增强 miR-129-5p 表达,下调 HMGB1 表达(P<0. 05)。 miR-129-5p 是 FGD5-AS1 的靶基因,抑制 miR-129-5p 表达可逆转沉默 FGD5-AS1 对 OSCC 细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。 体内实验显 示,沉默 FGD5-AS1 明显抑制移植瘤生长和 HMGB1、Ki67 表达(P<0. 05),抑制 miR-129-5p 则相反;抑制 miR-129- 5p 可逆转沉默 FGD5-AS1 对肿瘤生长和 HMGB1、Ki67 表达的抑制作用(P<0. 05)。

结论 FGD5-AS1 在 OSCC 细胞 中上调,干扰 FGD5-AS1 可通过靶向调控 miR-129-5p / HMGB1 轴,抑制 OSCC 细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡。

阅读原文：LncRNA FGD5-AS1对口腔鳞状细胞癌细胞恶性表型的影响.pdf