实验方法
小鼠慢性免疫性肝损伤模型
1.造模材料 动物：C57BL/6J黑色小鼠，体重20～30g，雌雄兼用；药物：半乳糖胺，冻干皮内注射卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin, BCG)，福氏完全佐剂。
2.造模方法 预先做肝功能，剔除不正常小鼠。
临用前将半乳糖胺酸盐用灭菌生理盐水配制成中性溶液(0.45mol/L)；福氏不全佐剂(FICA)：取液状石蜡8.5ml，加二缩甘露醇单油酸酯1.5ml，搅拌均匀后分装小瓶，高压灭菌备用；福氏完全佐剂(freund complete adjuvant, FCA)：临用前取FICA加入BCG(5mg/10ml)充分乳化。
模型组小鼠分别腹腔注射半乳糖胺1500mg/kg，同时肢体皮下注射0.1ml新配制的 FCA，BCG临用前以灭菌生理盐水制成5mg/10ml，皮下注射，剂量与FCA相同，对照组腹腔注射等量生理盐水，每周一次，连续13周。
3.造模原理 采用半乳糖胺联用FCA作为模型剂，长期反复刺激纯系小鼠使小鼠肝组织汇管区普遍出现碎屑状坏死。半乳糖胺是一种肝毒药物，它在引起肝细胞损害的同时尚伴有明显的T淋巴细胞、M浸润及贮脂细胞增生，为非特异激活剂，尽管其作用和其含有的分枝杆菌(Mycobacterium)不完全相同，但具有相同的抗原作用。FCA除抗原作用外，尚有对抗原特性的调节作用以及刺激宿主产生抗体，并使病理反应从快速型转变为迟缓型。两者联用有利于自身免疫反应的产生和慢性活动性肝炎的形成。
4.造模后变化 在整个实验期间，模型组动物精神萎靡，食欲缺乏而消瘦，体重明显减轻；对照组存活率为100％，模型组为66.7％。
模型组γ-球蛋白均明显增高，在13周时约为对照组的2倍；小鼠脾重于13周时均明显增加，约为对照组的2倍。第13周后，模型组血清酶及胆红素均有不同程度的升高，ALT约为对照组的3倍，AST为4倍。
模型组于第5周汇管区可见由小圆形细胞组成的轻度细胞浸润，肝实质变性和灶性坏死也不严重。至第9周，汇管区细胞浸润增加，肝实质变性和灶性坏死明显，并发现“碎屑样”坏死(piecemeal necrosis)及库普弗细胞反应。第13周，汇管区周围肝细胞严重“碎屑样”坏死(CAH形成率85％。CAH形成率的计算：CAH形成率％=碎屑坏死数/存活数×100％)，可观察到小圆圈细胞、浆细胞、巨噬细胞及多形核白细胞大量浸润，小叶内肝细胞变性和坏死更为明显，但小胆管增生并不活跃，未发现结节形成。
电镜下观察：细胞核呈不规则变形，粗面内质网，核糖体颗粒减少，线粒体肿胀，在细胞间隙可见胶原纤维增生。致敏淋巴细胞进入狄氏间隙与肝细胞密切接触，贮脂细胞功能活跃，合成并释放胶原纤维。在窦性隙内可见肥大的库普弗细胞、淋巴细胞等，同时可见肝细胞邻接面增宽和微绒毛(microvilli, MV)的改变。
