高原急性缺氧肠道应激损伤小鼠模型的构建与评价

2024年03月12日 浏览量: 评论(0) 来源:实验动物与比较医学2024年第1期 作者:郑建华 法云智 董巧燕 邱业峰 陈菁青 责任编辑:lascn
摘要:通过模拟急性缺氧环境,建立实验性高原小鼠肠道应激损伤模型,为探讨高原急性胃肠病的致病机 制以及防治措施奠定基础。

目的 通过模拟急性缺氧环境,建立实验性高原小鼠肠道应激损伤模型,为探讨高原急性胃肠病的致病机 制以及防治措施奠定基础。

方法 根据体重按随机数字表法,将36只SPF级成年雄性BALB/c小鼠分为常氧24 h 组、常氧72 h组、低氧24 h组和低氧72 h组,每组9只。常氧对照组小鼠饲养于常规屏障环境中;低氧应激组饲养 于屏障环境中的低氧舱内,氧气浓度设定为10%以模拟高原环境,分别应激24 h和72 h,建立急性缺氧所致肠道损 伤模型。造模结束后,称量小鼠体重,用1%戊巴比妥钠麻醉后断颈处死各组小鼠,采集十二指肠和结肠组织并进 行HE染色后观察肠道组织病理形态,通过蛋白质印迹和免疫组织化学法检测肠道组织中紧密连接相关蛋白表达水 平,应用实时荧光定量PCR检测炎性细胞因子和趋化因子的mRNA表达水平,采用TUNEL染色法检测肠上皮细胞 凋亡活性等指标,从而对该模型的肠道损伤相关表型进行评价。

结果 与常氧组相比,低氧24 h组和低氧72 h组的 小鼠表现为体重减轻,十二指肠绒毛长度变短、隐窝结构异常、绒毛/隐窝比下降,结肠黏膜炎性细胞浸润、隐窝 结构不规则。低氧 24 h 组和低氧 72 h 组小鼠的十二指肠和结肠组织中闭锁蛋白 (Occludin) 及闭锁小带蛋白 (zonula occludens-1,ZO-1) 表达水平明显下降 (P<0.05),十二指肠组织中促凋亡蛋白Bax表达明显上调,抑凋 亡蛋白Bcl-2表达明显下调 (P<0.05),而且肠上皮细胞的凋亡活性显著增强 (P<0.05)。此外,缺氧应激24 h和 72 h 后,小 鼠 十 二 指 肠 组 织 中 白 细 胞 介 素 (interlenkin,IL) -1β、IL-6、单 核 细 胞 趋 化 蛋 白-1 (monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1) 及肿瘤坏死因子-α (tumour necrosis factor-α,TNF-α) mRNA水平显著增 高 (P<0.05);缺氧应激24 h后,小鼠结肠组织中炎性细胞因子的表达水平无显著变化 (P>0.05);但缺氧应激72 h 后,小鼠结肠组织中促炎因子 IL-1β、TNF-α、IL-6、MCP-1 以及抗炎因子 IL-10 mRNA 水平显著增高 (P<0.05)。

结论 利用低氧舱模拟高原急性缺氧环境可导致应激小鼠肠道组织结构异常、肠屏障功能障碍,并诱导肠上皮细胞 凋亡,引发肠道炎性反应。这些结果表明急性缺氧应激肠道损伤小鼠模型构建成功。

阅读原文:高原急性缺氧肠道应激损伤小鼠模型的构建与评价.pdf

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