目的 探讨 ＷＮＫ２ 对肝细胞癌（ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｏｃｅｌｌｕａ ｃａｒｃｉｎｏｍａ， ＨＣＣ）中 ＥＲＫ１ ／ ２ ／ ＲＯＳ ／ ＳＨＰ２ 信号通路 的影响，并探讨其在 ＨＣＣ 细胞增殖和迁移中的作用。

方法 将 ＷＮＫ２⁃ｍｉｍｉｃ 和 ｓｈ⁃ＲＮＡ ＷＮＫ２ 以及相应的阴性对 照转染 ＨｅｐＧ２ 细胞，采用 ＢＡＬＢ／ ｃ 裸鼠皮下成瘤实验检测 ＷＮＫ２ 对肝细胞癌增殖能力的影响；采用 Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ 检 测瘤组织中 ＷＮＫ２、ｐ４０、ｇｐ９０、ｐ⁃ＳＨＰ２、ｐ⁃ＡＫＴ 和 ｐ⁃ＥＲＫ１ ／ ２ 的表达；使用 ＳＨＰ２ 抑制剂 ＰＨＰＳ１ 进行处理之后，采用 Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ 检测 ＨｅｐＧ２ 细胞中 ＷＮＫ２、 ｐ４０、 ｇｐ９０、 ｐ⁃ＳＨＰ２、 ｐ⁃ＡＫＴ 和 ｐ⁃ＥＲＫ１ ／ ２ 的表达；使用细胞划痕实验和 Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ 检测 ＨｅｐＧ２ 细胞的迁移能力和侵袭能力；采用单克隆增殖实验和 ＣＣＫ⁃８ 检测 ＨｅｐＧ２ 细胞的增殖能力。

结果 与 ｓｈ⁃ＮＣ 组相比，ｓｈ⁃ＲＮＡ ＷＮＫ２ 组裸鼠的瘤体体积显著增大（Ｐ ＜ ０.０１）；而与 ＮＣ⁃ｍｉｍｉｃ 组相比，ＷＮＫ２⁃ ｍｉｍｉｃ 组裸鼠的瘤体体积显著减小（Ｐ ＜ ０.０１）；Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ 结果显示，与 ｓｈ⁃ＮＣ 组相比，ｓｈ⁃ＲＮＡ ＷＮＫ２ 组 ＷＮＫ２ 的 表达显著降低（Ｐ ＜ ０.０１），ｐ４０、ｇｐ９０、ｐ⁃ＳＨＰ２、ｐ⁃ＡＫＴ 和 ｐ⁃ＥＲＫ１ ／ ２ 的表达显著升高（Ｐ ＜ ０.０１）；而与 ＮＣ⁃ｍｉｍｉｃ 组 相比，ＷＮＫ２⁃ｍｉｍｉｃ 组 ＷＮＫ２ 的表达显著升高（Ｐ ＜ ０.０１），ｐ４０、ｇｐ９０、ｐ⁃ＳＨＰ２、ｐ⁃ＡＫＴ 和 ｐ⁃ＥＲＫ１ ／ ２ 的表达显著降低 （Ｐ ＜ ０.０１）；在体外实验当中，相对于 ｓｈ⁃ＮＣ 组，ｓｈ⁃ＲＮＡ ＷＮＫ２ 组中 ＷＮＫ２ 的表达显著降低（Ｐ ＜ ０.０１），ｐ４０、ｇｐ９０、 ｐ⁃ＳＨＰ２、ｐ⁃ＡＫＴ 和 ｐ⁃ＥＲＫ１ ／ ２ 的表达显著升高（Ｐ ＜ ０.０１）；相对于 ｓｈ⁃ＮＣ ＋ ＰＨＰＳ１ 组，ｓｈ⁃ＲＮＡ ＷＮＫ２ ＋ ＰＨＰＳ１ 组中 ＷＮＫ２ 的表达显著降低（Ｐ ＜ ０.０１），而 ｐ４０、ｇｐ９０、ｐ⁃ＳＨＰ２、ｐ⁃ＡＫＴ 和 ｐ⁃ＥＲＫ１ ／ ２ 的表达则被逆转并且与 ｓｈ⁃ＮＣ ＋ ＰＨＰＳ１ 组不具有显著性差异（Ｐ ＞ ０.０５）；细胞划痕实验和 Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ 结果显示，相对于 ｓｈ⁃ＮＣ 组，ｓｈ⁃ＲＮＡ ＷＮＫ２ 组 ＨｅｐＧ２ 细胞的迁移和侵袭能力显著升高（Ｐ ＜ ０.０１）；ｓｈ⁃ＮＣ ＋ ＰＨＰＳ１ 组和 ｓｈ⁃ＲＮＡ ＷＮＫ２ ＋ ＰＨＰＳ１ 组 ＨｅｐＧ２ 细胞 的迁移和侵袭能力显著降低并且不具有显著性差异（Ｐ ＞ ０.０５）；单克隆增殖实验结果显示，相对于 ｓｈ⁃ＮＣ 组，ｓｈ⁃ ＲＮＡ ＷＮＫ２ 组 ＨｅｐＧ２ 细胞的增殖能力显著升高（Ｐ ＜ ０.０１），而 ｓｈ⁃ＮＣ ＋ ＰＨＰＳ１ 组和 ｓｈ⁃ＲＮＡ ＷＮＫ２ ＋ ＰＨＰＳ１ 组 ＨｅｐＧ２ 细胞的增殖能力显著降低并且不具有显著性差异（Ｐ ＞ ０.０５）。

结论 ＷＮＫ２ 可以抑制 ＥＲＫ１ ／ ２ ／ ＲＯＳ ／ ＳＨＰ２ 信号通路，从而抑制 ＥＲＫ１ ／ ２ ／ ＡＫＴ 信号通路，延缓 ＨＣＣ 的增殖和迁移。

阅读原文：ＷＮＫ２通过抑制ＥＲＫ１／２／ＲＯＳ／ＳＨＰ２信号通路延缓肝细胞癌的增殖和侵袭.pdf