实验方法
大鼠混合反流性食管炎模型
1.造模材料 动物：健康SD雄性大鼠，体重(240±20)g；药物：戊巴比妥。
2.造模方法 大鼠禁食(不禁水)24h后，用2％戊巴比妥0.2ml/100g腹腔麻醉，沿腹正中线开腹，用组织线结扎横过胃食管交界处的胃左动脉分支后，于食管一胃交界处纵行钝性分离贲门肌约1cm，分离至黏膜层完全暴露于视野中，在十二指肠下1/3处避开血管半结扎肠腔，约等10min后关腹。术后24h禁食不禁水，术后1周大鼠存活，饮食活动正常，则模型建立。模型成功标准，以24h食道内pH及胆红素检测仪测量为准。
3.造模原理 手术导致动物反流性食管炎。
4.造模后变化 光镜半薄切片：正常对照组为典型的复层鳞状上皮，结构和细胞层次无变形。模型组黏膜损害较严重，出现糜烂及浅溃疡，黏膜下较多炎细胞浸润，乳头层延伸，基底细胞层增厚等。扫描电镜(scanning electron microscope, SEM)下见对照组食管黏膜表面光滑，呈规则波浪状，相邻细胞连接正常；模型组见较明显表层上皮细胞脱落，细胞体积增大，细胞连接减少或消失，细胞表面微皱明显减少，不规则。高倍SEM下见对照组细胞排列整齐，最上层细胞表面为均匀细小的微皱状结构，细胞大小形态正常，可见细胞连接。透射电镜(transmission electron microscope, TEM)下可见对照组各层细胞排列正常，细胞形态规则，细胞器结构保存良好，可见线粒体、内质网等。角质层细胞排列规则，表面光滑，角化细胞相互之间有桥粒相连；棘细胞内可见较多张力丝，细胞器丰富，细胞外周连接多见；基底细胞层基底膜薄、致密、连续，可见桥粒、半桥粒。模型组角质层细胞角化明显，排列不规则，增厚，连接少见；棘细胞层张力丝消失，细胞间隙呈囊泡状明显增宽，上皮细胞形态不规则，细胞体积变大，细胞膜不连续、核扭曲，细胞质内可见空泡形成及退行性变化的膜结构和细胞器，线粒体空化；基底细胞层见基底膜不连续、部分增厚或见厚薄不均，桥粒、半桥粒减少。硝酸镧染色后，TEM观察见对照组很少量上皮细胞间隙连接处有电子致密的镧颗粒浸入，细胞内无镧颗粒沉积。模型组大部分细胞间隙由镧颗粒填充，胞质中亦见镧颗粒。
