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方法一

1.造模材料  动物：NIH品系裸小鼠(nu/nu)，SPF级，鼠龄4～8周，体重15～20g，雌雄兼用(饲养于隔离室恒温恒湿层流架中，饲以灭菌水和饲料)；药物：人胃低分化黏液腺癌细胞系MGC-803，戊巴比妥；器械：套管针。

2.造模方法  将冻存的人胃低分化黏液腺癌细胞系MGC-803复苏置于37℃ 5％CO2培养箱中培育，生长液含85％RPMI1640、15％小牛血清、1％青链霉素、1％NaHCO3，隔日传代，待生长液变黄镜下观察细胞生长良好时，用0.5％胰酶+0.2％EDTA(1：4)于室温下消化10s后，吹打成细胞悬液，收集备用。癌细胞悬液按每只1×1000000/0.3ml的剂量接种到裸小鼠近腋右背侧皮下至成瘤，观察肿瘤生长情况并统计成瘤率。当移植瘤直径达1cm时(接种30～35天)，取活力好的瘤组织块，经RPMI 1640液漂洗，剪成1～2mm3大小之碎块备用。所有接种按无菌操作进行，将完整瘤组织块分两组接种：皮下移植组(以下简称皮下组)，用套管针吸取1块组织块接种于近腋背侧皮下。胃壁移植组(以下简称胃壁组)，2％戊巴比妥30mg/kg腹腔麻醉，将麻醉鼠固定于手术板上，常规消毒。铺洞巾，于左上腹开一纵形切口长约1cm，打开腹腔将胃轻轻提出。用眼科剪于胃大弯腺胃处将胃浆膜开一3mm长的小口，而后将一1～2mm3大小之瘤块置于肌层和浆膜层之间，荷包缝合包埋好瘤组织块。将胃回纳于腹腔，关腹，缝皮，待苏醒后置于层流架饲养，每周观察2次。观察两组移植瘤发生发展情况，计算成瘤率。分3阶段(20天以内、20～40天、40天至衰竭期)处死成瘤鼠，详细检查浸润转移情况。

3.造模原理  完整瘤组织块原位接种建立人胃癌裸小鼠原位移植模型。

4.造模后变化  完整瘤组织块的皮下移植：成瘤率82.1％，早、中期移植瘤活动性大，色红润。晚期移植瘤活动性小，结节状，瘤结节最大达4.5cm×3.0cm，表面可见溃疡，切面灰白，境界清楚，坏死程度不等。镜下癌细胞片块状、巢状，结缔组织分隔，不形成腺样结构，黏液较少，核大不规则，核膜厚，见病理性核分裂像，间质血管壁薄，腔大弯曲，有些仅由一层内皮细胞形成不规则腔隙，瘤细胞与管壁紧密黏附，出现肺转移的小血管内见大量癌细胞形成癌栓并突破管壁生长。

完整瘤组织块的胃壁移植：成瘤率86.9％。接种2～3周即可在左上腹触及一小硬结，晚期出现蛙状腹。分阶段处死成瘤鼠，早期和中期移植瘤于胃壁上浸润性生长，与其他脏器无明显粘连，少数胃周淋巴结、肠系膜淋巴结肿大。晚期极度衰弱，开腹见血性腹水，肿瘤突向腹腔，色灰白或半透明，表面有黏液，与大网膜、结肠、肝、胰、脾广泛粘连，肝脏可见多个绿豆大瘤结节，少数肿瘤甚至突破膈肌生长。镜下细胞形态结构类似于皮下移植瘤，但黏液较皮下移植瘤多，有些癌细胞呈条索状排列，少数有腺样结构，偶见淋巴管内瘤栓。随着荷瘤时间的延长，肿瘤从肌层向黏膜层侵犯，破坏胃壁结构。出现肺转移的肺小静脉内见癌栓，管壁周围可见散在癌细胞团。肝脏内可见转移灶肿瘤中央坏死。有的转移淋巴结大部分结构被癌细胞破坏，仅见少量淋巴细胞。

方法二

1.造模材料  动物：BALB/c-nu/nu裸小鼠，6～8周龄，在SPF条件下饲养；药物： SGC-7901人胃癌细胞株，戊巴比妥；器械：套管针。

2.造模方法  将冻存的SGC-7901人胃癌细胞株复苏，用含10％小牛血清的RPMI-1640培养液培养于CO2恒温孵箱中，温度为37℃，CO2浓度为5％，隔日换培养液1次，以0.02％EDTA消化传代。待生长液变黄镜下观察细胞生长良好时，用0.5％胰酶+0.2％EDTA(1：4)于室温下消化10s后，吹打成细胞悬液，收集备用。癌细胞悬液按每只1×1000000/0.3ml的剂量接种到裸小鼠近腋右背侧皮下至成瘤，观察肿瘤生长情况并统计成瘤率。当移植瘤直径达1cm时(接种30～35天)，取活力好的瘤组织块，经1640液漂洗，剪成1～2mm3大小之碎块备用。

取6～8周龄健康裸小鼠，术前禁食12h。以0.5％的戊巴比妥麻醉(50mg/kg)，常规消毒皮肤，选择左侧正中旁切口，打开腹腔后将胃拉出，先用5-0丝线对腺胃胃壁浆膜层作荷包缝合(直径约0.5cm)，再用眼科剪细心剪开荷包中心胃壁浆肌层，如此制备腺胃黏膜小囊，然后将3～4块瘤组织块(直径为0.1cm)包埋至小囊内，扎紧荷包缝线，最后以4-0丝线分别缝合腹膜(含肌层)及皮肤。精心饲养观察，待动物濒临死亡时处死解剖。

3.造模原理  完整瘤组织块原位接种建立人胃癌裸小鼠原位移植模型。

4.造模后一般变化  所有正式实验动物均无意外死亡。模型组裸小鼠移植术后1周左右动物伤口愈合，皮肤缝线脱落。术后第3～4周原位肿瘤突破潜伏期，上腹可触及0.2～0.3cm的小结节；6～8周左上腹结节逐渐增大且质地变硬，8～10周左右可触及1.0～1.5cm的包块，以后肿瘤迅速长大，左上腹包块透壁可见，表面呈结节状，动物逐渐消瘦；12周以后动物极度消瘦，活动受限，部分动物瘤体突出至皮下；16周以后动物进食减少，逐渐衰竭而死亡。

5.造模后病理变化  肉眼检查可见胃壁上有灰白色鱼肉状包块，与网膜粘连，胃腔受压，胃底扩张，有大量食物残留；部分动物可见少量腹水，肝脏表面可见数个至10多个灰白色小结节，直径约2～5mm大小。

镜检示原位病灶为腺癌组织。癌细胞排列呈巢状，在胃壁呈浸润性生长，中央有片状坏死；癌细胞核大，畸形，核仁明显，病理性核分裂像多见。电镜下更可清楚地观察到巨核及怪核，核仁明显，且数目增多，染色质浓集，细胞间隙增宽及线粒体空泡变性等。此外，肝转移灶及腹水涂片均为同原位癌灶一致的癌组织。