学术文章
白芷在神经病理性疼痛中对MrgprD⁃TRPA1通路的调控作用分析
目的 本研究拟通过建立坐骨神经慢性缩窄损伤( chronic constriction injury,CCI)小鼠模型,分析和 探讨白芷在神经病理性疼痛中的镇痛效果及其对 MrgprD⁃TRPA1 信号通路的调控作用。
方法 无菌外科手术结扎 缠绕 30 只小鼠坐骨神经制备 CCI 小鼠模型;VonFrey 实验检测白芷对小鼠机械刺激疼痛行为学变化,热辐射实验 评估白芷对小鼠热痛觉过敏情况;Western Blot、免疫荧光、RT⁃PCR 检测白芷对小鼠 MrgprD 和 TRPA1 蛋白表达水 平、DRG 阳性神经元数量、MrgprD 和 TRPA1 mRNA 水平的影响;通过对 HEK293 细胞分别单转染和共转染 MrgprD、 TRPA1 质粒后的钙成像实验,分析荧光信号强度差异性。
结果 共成功制备了 25 只 CCI 小鼠模型,造模率达到 83.33%(25 / 30);白芷灌胃的 CCI 小鼠机械性阈值和缩足潜伏时间均显著大于对照组(P < 0.05);白芷灌胃的 CCI 小鼠中 MrgprD 和 TRPA1 蛋白表达水平均显著低于对照组(P < 0.05);白芷灌胃的 CCI 小鼠 DRG 中 MrgprD 和 TRPA1 阳性神经元的数量显著低于对照组(P < 0.05);白芷灌胃的 CCI 小鼠中 MrgprD 和 TRPA1 mRNA 相对表达 水平均显著低于对照组(P < 0.05);共转染 MrgprD 和 TRPA1 质粒的 HEK293 细胞中荧光强度显著高于单转染和 对照组(P < 0.05)。
结论 本研究通过探究白芷在 CCI 小鼠模型中镇痛的效果,证明了 MrgprD⁃TRPA1 是神经病 理性疼痛的重要作用靶点,揭示了白芷可以通过调控 MrgprD⁃TRPA1 信号转导通路来抑制神经病理性疼痛程度,这 为后续开发新型临床镇痛药物及镇痛机制的深入研究奠定了基础。