学术文章
WNK 2通过抑制ERK1/2/ROS/SHP 2信号通路延缓肝细胞癌的增殖和侵袭
目的 探讨 WNK2 对肝细胞癌(hepatocellocellua carcinoma, HCC)中 ERK1 / 2 / ROS / SHP2 信号通路 的影响,并探讨其在 HCC 细胞增殖和迁移中的作用。
方法 将 WNK2⁃mimic 和 sh⁃RNA WNK2 以及相应的阴性对 照转染 HepG2 细胞,采用 BALB/ c 裸鼠皮下成瘤实验检测 WNK2 对肝细胞癌增殖能力的影响;采用 Western Blot 检 测瘤组织中 WNK2、p40、gp90、p⁃SHP2、p⁃AKT 和 p⁃ERK1 / 2 的表达;使用 SHP2 抑制剂 PHPS1 进行处理之后,采用 Western Blot 检测 HepG2 细胞中 WNK2、 p40、 gp90、 p⁃SHP2、 p⁃AKT 和 p⁃ERK1 / 2 的表达;使用细胞划痕实验和 Transwell 检测 HepG2 细胞的迁移能力和侵袭能力;采用单克隆增殖实验和 CCK⁃8 检测 HepG2 细胞的增殖能力。
结果 与 sh⁃NC 组相比,sh⁃RNA WNK2 组裸鼠的瘤体体积显著增大(P < 0.01);而与 NC⁃mimic 组相比,WNK2⁃ mimic 组裸鼠的瘤体体积显著减小(P < 0.01);Western Blot 结果显示,与 sh⁃NC 组相比,sh⁃RNA WNK2 组 WNK2 的 表达显著降低(P < 0.01),p40、gp90、p⁃SHP2、p⁃AKT 和 p⁃ERK1 / 2 的表达显著升高(P < 0.01);而与 NC⁃mimic 组 相比,WNK2⁃mimic 组 WNK2 的表达显著升高(P < 0.01),p40、gp90、p⁃SHP2、p⁃AKT 和 p⁃ERK1 / 2 的表达显著降低 (P < 0.01);在体外实验当中,相对于 sh⁃NC 组,sh⁃RNA WNK2 组中 WNK2 的表达显著降低(P < 0.01),p40、gp90、 p⁃SHP2、p⁃AKT 和 p⁃ERK1 / 2 的表达显著升高(P < 0.01);相对于 sh⁃NC + PHPS1 组,sh⁃RNA WNK2 + PHPS1 组中 WNK2 的表达显著降低(P < 0.01),而 p40、gp90、p⁃SHP2、p⁃AKT 和 p⁃ERK1 / 2 的表达则被逆转并且与 sh⁃NC + PHPS1 组不具有显著性差异(P > 0.05);细胞划痕实验和 Transwell 结果显示,相对于 sh⁃NC 组,sh⁃RNA WNK2 组 HepG2 细胞的迁移和侵袭能力显著升高(P < 0.01);sh⁃NC + PHPS1 组和 sh⁃RNA WNK2 + PHPS1 组 HepG2 细胞 的迁移和侵袭能力显著降低并且不具有显著性差异(P > 0.05);单克隆增殖实验结果显示,相对于 sh⁃NC 组,sh⁃ RNA WNK2 组 HepG2 细胞的增殖能力显著升高(P < 0.01),而 sh⁃NC + PHPS1 组和 sh⁃RNA WNK2 + PHPS1 组 HepG2 细胞的增殖能力显著降低并且不具有显著性差异(P > 0.05)。
结论 WNK2 可以抑制 ERK1 / 2 / ROS / SHP2 信号通路,从而抑制 ERK1 / 2 / AKT 信号通路,延缓 HCC 的增殖和迁移。