目的 本研究拟建立一种灵敏快速的实时荧光定量 ＰＣＲ（ｒｅａｌ⁃ｔｉｍｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ， ｑＰＣＲ）方法，用 于检测大、小鼠木糖葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓ， Ｓ． ｘｙｌｏｓｕｓ）。

方法 本研究选择特异性 ｇｅｈＭ 基因片段作为靶 标合成了一套引物，建立了木糖葡萄球菌检测的 ｑＰＣＲ 方法。 对木糖葡萄球菌标准菌株和其他非目标菌进行特异 性分析。 将木糖葡萄球菌的 ＤＮＡ 进行 １０ 倍稀释测定其灵敏度。 用送检的样本进行了临床应用并测序验证，同时 与培养法进行比较。

结果 仅木糖葡萄球菌出现特异性扩增曲线，而其他非目标菌未出现，表明设计的引物对木 糖葡萄球菌具有特异性，灵敏度为 １００ ｆｇ ／ μＬ，组内和组间重复性均小于 ３％。 共检测 ６０ 份临床样品，有 ５ 份样品扩 增曲线为典型的 Ｓ 曲线，将该 ｑＰＣＲ 产物克隆测序并进行同源性比对，该序列与木糖葡萄球菌的同源性为 ９９.６３％， 表明该样本木糖葡萄球菌核酸阳性，所检测样本阳性率为 ８.３％，而培养法的阳性率为 ６.７％，ｑＰＣＲ 方法阳性检出 率比培养法略高。

结论 建立的木糖葡萄球菌 ｑＰＣＲ 方法，具有快速、灵敏度高、特异性强和重复性好的优点，可用 于实验动物木糖葡萄球菌的检测。

阅读原文：木糖葡萄球菌实时荧光定量ＰＣＲ检测方法的建立及其应用.pdf