学术文章
AOM/DSS结肠癌模型优化及其肠道菌群变化探究
目的 优化氧化偶氮甲烷（ａｚｏｘｙｍｅｔｈａｎｅ，ＡＯＭ）联合葡聚糖硫酸钠（ｄｅｘｔｒａｎ ｓｏｄｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ，ＤＳＳ）造模 结肠炎相关性结肠癌（ ｃｏｌｉｔｉｓ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ，ＣＡＣ） 方法并探究肠道菌群在 ＣＡＣ 中的发病机制。
方法 通过 ＡＯＭ 不同注射次数联合自由饮用 ＤＳＳ 的方法建立 Ａ（ＡＯＭ １ 次注射）和 Ｂ（ＡＯＭ ２ 次注射）模型组，正常组采 用腹腔注射生理盐水联合饮用纯净水，每组 １０ 只。 造模结束后通过 ＤＡＩ 评分、结肠长度、成瘤率及死亡率等指标 综合评估，选择最佳的造模方案。 然后对 Ｂ 模型组小鼠进行实验，取血清以 ＥＬＩＳＡ 法检测白细胞介素⁃６（ ＩＬ⁃６）、肿 瘤坏死因子⁃α（ＴＮＦ⁃α）及肿瘤标志物 ＣＡ１９９、ＣＥＡ、ＣＡ７２４ 含量；同时进行 ＨＥ 染色观察结肠病变；并对小鼠粪便进 行 １６Ｓ ｒＤＮＡ 高通量基因测序法分析，以探究 ＣＡＣ 小鼠肠道菌群的变化。
结果 单次和加强 ＡＯＭ 注射联合 ＤＳＳ 均能诱导 ＣＡＣ 小鼠模型。 但与 Ａ 模型组相比，Ｂ 模型组小鼠结肠内增生物较大，排列紧密且形态大小较一致，成瘤 率达到 １００％。 与正常组相比，Ｂ 模型组 ＩＬ⁃６ 显著升高（Ｐ ＜ ０.０５），ＴＮＦ⁃α 含量升高（Ｐ ＞ ０.０５）；肿瘤标志物除 ＣＡ７２４ 外，ＣＡ１９９ 和 ＣＥＡ 含量均明显升高（Ｐ ＜ ０.０５）；ＨＥ 病理结肠内炎性细胞的浸润，并伴有管腔表面显示出高 级别上皮内肿瘤样改变。 菌群结果显示，与正常组相比，ＣＡＣ 小鼠肠道菌群物种多样性及丰度降低，疣微菌门和放 线菌门增多（Ｐ ＜ ０.０５），拟杆菌门和弯曲菌门减少（Ｐ ＜ ０.０５）。 阿克曼菌、普雷沃菌、瘤胃球菌、双歧杆菌等显著 增多（Ｐ ＜ ０.０５）；罗氏菌属、Ｍｕｒｉｂａｃｕｌａｃｅａｅ、理研菌属、厌氧原体属等显著减少（Ｐ ＜ ０.０５）。
结论 ＡＯＭ ２ 次注射 联合自由饮用 １.５％（１.５ ｇ ／ １００ ｍＬ）ＤＳＳ 诱导的 ＣＡＣ 模型小鼠结肠成瘤率高、肿瘤形态大小均一、死亡率低，可作 为药效学实验评价的优选造模方案。 多种肠道菌群紊乱或功能失调，造成的通透性增高，肠黏膜屏障功能破坏，进 而诱发肠源性内毒素释放，导致持续的炎症反应或是诱发 ＣＡＣ 发病的间接或直接原因。
