学术文章
急性缺血性脑卒中瘀毒互结证大鼠模型“脑－脾炎症耦联”机制探讨
目的 探讨急性缺血性脑卒中瘀毒互结证大鼠模型脑损伤与脾损害的相关性，分析对 ＭＣＰ⁃１／ ＣＣＲ２ 趋化因子信号轴的影响。
方法 ４０ 只雄性 ＳＤ 大鼠随机分为假手术组（ ｓｈａｍ）、角叉菜胶联合干酵母菌瘀毒 互结证（Ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ ／ Ｙｅａｓｔ，ＣＡ／ Ｙ）组（单纯证候组）、大脑中动脉阻塞（ｍｉｄｄｌｅ ｃｅｒｅｂｒａｌ ａｒｔｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ，ＭＣＡＯ）组（单 纯疾病组）、大脑中动脉阻塞瘀毒互结证（ＭＣＡＯ＋ＣＡ／ Ｙ）组（病证结合组），每组 １０ 只。 ＣＡ／ Ｙ 组与 ＭＣＡＯ＋ＣＡ／ Ｙ 组于造模首日经腹腔注射角叉菜胶 １０ ｍｇ ／ ｋｇ、第 ２ 日背部皮下注射干酵母悬液 ２ ｍｇ ／ ｋｇ，ＭＣＡＯ 组及 ＭＣＡＯ＋ＣＡ／ Ｙ 组于第 ２ 日采用线栓法建立大脑中动脉阻塞模型。 脑梗死模型术后 ２４ ｈ，对各组大鼠进行神经功能缺损评分，采 用 ＴＴＣ 染色法观察脑梗死面积百分比，取脾测定脾重量，采用 Ｓｐｅａｒｍａｎ 相关系数分析脑梗死面积百分比与脾重量 的相关性，苏木素－伊红（ＨＥ）染色法观察脑组织及脾组织病理形态，酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）检测大鼠血浆中 单核细胞趋化蛋白－１（ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ １，ＭＣＰ⁃１）、干扰素－γ（ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ⁃γ，ＩＦＮ⁃γ）含量，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 法 检测缺血侧脑组织趋化因子 Ｃ⁃Ｃ－基元受体 ２（ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ Ｃ⁃Ｃ⁃ｍｏｔｉｆ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２，ＣＣＲ２）蛋白表达。
结果 与 ｓｈａｍ 组 比较，ＭＣＡＯ 组和 ＭＣＡＯ＋ＣＡ／ Ｙ 组的神经功能缺损评分、脑梗死面积、血浆中 ＭＣＰ⁃１ 与 ＩＦＮ⁃γ 含量均显著升高（Ｐ＜ ０.０１），脾重量显著下降（Ｐ＜０.０１），脑组织中 ＣＣＲ２ 蛋白表达明显上调（Ｐ＜ ０.０５）；与 ＣＡ／ Ｙ 组比较，ＭＣＡＯ 组和 ＭＣＡＯ＋ＣＡ／ Ｙ 组的神经功能缺损评分、脑梗死面积显著升高（Ｐ＜０.０１），脾重量显著下降（Ｐ＜０.０１），脑组织和脾组 织中 ＣＣＲ２ 蛋白表达均明显上调（Ｐ＜０.０５）；与 ＭＣＡＯ 组比较，ＭＣＡＯ＋ＣＡ／ Ｙ 组的脑梗死面积显著升高（Ｐ＜０.０１）， 脾重量明显下降（ Ｐ ＜ ０.０５）。 Ｓｐｅａｒｍａｎ 相关分析显示，脾重量与脑梗死面积百分比呈负相关（ Ｐ ＜ ０.０１， ｒ ＝ － ０.９７１１）。 病理形态学观察结果显示，ＭＣＡＯ＋ＣＡ／ Ｙ 组病理改变最为严重，脑组织皮层中可见大脑液化坏死灶，病 灶中神经元细胞排列稀疏、紊乱，体积萎缩，少部分空泡化和核固缩，大部分神经元细胞红色变性、坏死，小胶质细 胞增生明显，小血管明显增多，间质脂质变性；脾组织部分动脉周围淋巴鞘细胞密度减低，边缘区增宽。
结论 急 性缺血性脑卒中瘀毒互结证大鼠模型脑损伤与脾损害存在相关性，可能与 ＭＣＰ⁃１／ ＣＣＲ２ 趋化因子信号轴参与“脑－ 脾炎症耦联”机制有关。
