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补阳还五汤减轻氧化应激保护脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障的作用研究
目的 探究补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWD)降低氧化应激水平保护脑缺血再灌注 损伤(cerebral ischemia / reperfusion injury,CIRI)大鼠血脑屏障(blood⁃brain barrier,BBB)的机制。
方法 采用线栓法 建立大鼠大脑中动脉栓塞再灌注(middle cerebral artery occlusion / reperfusion,MCAO/ R)模型,应用 PeriCam PSI 激 光散斑血流成像系统检测脑血流量判定模型建立是否成功。 通过 Zea Longa 评分评价大鼠神经功能缺损情况;HE 染色观察大鼠脑组织病理学改变;干湿重法检测脑水肿程度;伊文思蓝(Evans blue,EB)染色检测 BBB 通透性;透 射电镜观察 BBB 超微结构改变;试剂盒检测氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)的含量及总超氧化物 歧化酶(SOD)活性;免疫组织化学染色及 Western blot 检测基质金属蛋白酶-9(MMP⁃9)的表达水平;免疫荧光双染 及 Western blot 检测紧密连接蛋白( tight junction protein,TJP)中 Occludin、ZO⁃1、Claudin⁃5 蛋白的表达水平。
结果 BYHWD 能够降低 MCAO/ R 大鼠神经功能缺损评分,减轻脑组织病理学损伤,减轻血脑屏障结构破坏,延长紧密连 接结构致密区,减轻缺血侧大脑脑水肿情况,降低 BBB 通透性。 BYHWD 可以降低 ROS 与 MDA 水平,提高 SOD 活 性,降低 MMP⁃9 表达水平,提高 Occludin、Claudin⁃5、ZO⁃1 蛋白表达水平。
结论 BYHWD 可以升高 BBB 紧密连接 蛋白的表达水平,降低血脑屏障通透性,保护血脑屏障超微结构,减轻脑水肿,其机制可能与 BYHWD 抗氧化应激, 抑制 MMP⁃9 的激活相关。
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