学术文章
ＰＩ３ｋ／Ａｋｔ通路在大戟大枣汤抗不同分子表型乳腺癌中的调控作用
目的 探讨 ＰＩ３ｋ ／ Ａｋｔ 通路在大戟大枣汤（ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｆｉｓｃｈｅｒｉａｎａ Ｓｔｅｕｄ． ａｎｄ ｊｕｊｕｂａ， ＤＥＦＳＪ）抗雌激素受体（ＥＲ）阴性（－）和 ＥＲ 阳性（＋）乳腺癌中的调控作用，为乳腺癌的针对性治疗提供参考。
方法 制备 ＤＥＦＳＪ 提取液，采用 ＵＨＰＬＣ⁃Ｔｒｉｐｌｅ Ｑｕａｄ 仪进行质控分析。 ＤＥＦＳＪ 含药血清（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｅｒｕｍ，ＣＳ）依照体外血 清药理学方法进行获取，乳腺癌（ＥＲ－）ＭＤＡ⁃ＭＢ⁃４５３ 和（ＥＲ＋）ＭＣＦ⁃７ 细胞分别用不同浓度 ＤＥＦＳＪ⁃ＣＳ 干预 ４８ ｈ。 流式细胞术检测细胞周期分布，ＤＮＡ ｌａｄｄｅｒ 实验评估细胞凋亡程度，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 法检测 ＰＩ３ｋ ／ Ａｋｔ 通路相关蛋白表 达，实时定量聚合酶链反应（ｑＲＴ⁃ＰＣＲ）法检测 ＦｏｘＯ３ａ、ＦｏｘＯ１ａ 及 Ｂｉｍ ｍＲＮＡ 表达；激光共聚焦显微镜观察 ＦｏｘＯ３ａ 蛋白核转位。
结果 ＵＰＬＣ 对 ５ 批 ＤＥＦＳＪ 提取物进行了分析，结果表明制备工艺可行，质量可控，保证了药理学实 验结果的准确性。 体外实验中发现，ＤＥＦＳＪ⁃ＣＳ 能阻断细胞在 Ｇ２ ／ Ｍ 期（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１）；ＤＮＡ ｌａｄｄｅｒ 实验中呈现 典型的细胞凋亡梯带；与阴性对照组比较，ＤＥＦＳＪ⁃ＣＳ 能使 ｐ⁃ＰＩ３ｋ、ｐ⁃Ａｋｔ、ｐ⁃ＦｏｘＯ３ａ 及 ｐ⁃ＦｏｘＯ１ａ 蛋白表达降低（Ｐ＜ ０.０５，Ｐ＜０.０１），Ｂｉｍ 蛋白表达升高（Ｐ＜０.０５）；使 ＦｏｘＯ３ａ、ＦｏｘＯ１ａ ｍＲＮＡ 表达降低（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１），Ｂｉｍ ｍＲＮＡ 表 达升高（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１）；并能使细胞中 ＦｏｘＯ３ａ 蛋白呈现显著的核转位变化；且各数据结果均显示 ＤＥＦＳＪ⁃ＣＳ 对 （ＥＲ－）ＭＤＡ⁃ＭＢ⁃４５３ 细胞比对（ＥＲ＋）ＭＣＦ⁃７ 细胞作用效果更好。
结论 ＰＩ３ｋ ／ Ａｋｔ 通路参与了大戟大枣汤抗乳腺 癌作用的调控，作用效果因乳腺癌表型差异而不同。
