实验方法
复张性肺水肿实验模型
1.造模材料 动物:健康家兔,体重2.5~3.5kg,雌雄兼用;药物:戊巴比妥;器械:装有阀门的12F胸管(用12F导尿管在接尿袋端装阀门改装而成),60ml针筒。
2.造模方法 造模组动物行戊巴比妥经耳缘静脉注射麻醉(浓度为30%,1ml/kg),于胸骨右缘3、4肋间放置并固定装有阀门的12F胸管,抽去胸腔中因置管时漏入的气体,气囊打水5ml以防滑脱,绷带包扎,将阀门端置于背部正中,胶布固定。麻醉清醒后缓慢打气50~60ml(2.8kg以下者打气不超过50ml),此后每天打气8~15ml,具体用量以出现明显呼吸窘迫为限。7天后戊巴比妥经耳缘静脉麻醉,气管切开并插管,分离右侧颈动脉置管肝素化,连接生理记录仪及备取血样。实验开始后即刻用60ml针筒接阀门迅速抽气,并用简易呼吸器轻度鼓肺几次以促使肺复张。抽气前及抽气后1、3、5h行胸部CT检查,记录经CT检查证实已产生肺水肿的兔子抽气前及抽气后即刻、30min、1h、3h、5h平均动脉压(MAP)、心率(HR)及呼吸(R)并监测血气。5h后放血处死动物,解剖胸腔,观察心脏、肺脏情况,并取肺观察大体改变,取近肺门部小块组织,做病理检查(光镜及电镜观察)。余肺称重后置56℃恒温箱,24h后称干肺重,计算肺水肿指数、肺湿干比、肺含水量。对照组:未作特殊处理,行戊巴比妥经耳缘静脉注射麻醉后5h放血处死检测。
3.造模原理 负压抽吸行肺复张导致动物肺水肿。
4.造模后的变化 抽气后即刻至30min MAP、HR、R明显高于抽气前,1h后血压、心率、呼吸基本恢复正常;二氧化碳分压(PCO2)、pH抽气前后无明显改变;肺水肿指数、干肺重、肺湿干比、肺含水量实验组高于对照组。
影像学改变:30min CT扫描右侧可发现肺密度增高,与左侧对应部位密度差异明显,3~5h改变更明显。
病理学检查:右肺略重于左肺,水肿肺体积明显增大,切面呈泡沫状,以右肺中下叶为重。光镜检查:肺间质及肺泡水肿明显,中性粒细胞及单核细胞浸润。电镜检查:肺泡腔中性粒及单核细胞浸润,Ⅱ型上皮细胞线粒体及内质网肿胀,核周裂隙,板层小体排空现象明显。