心肌纤维化特殊染色方法比较与优化

2024年06月05日 浏览量: 评论(0) 来源:中国实验动物学报2024年第3期 作者:王亚恒 马嘉昕 雷雨 张连峰 吕丹 责任编辑:lascn
摘要:对目前已有心肌纤维化染色方法进行优化,弥补目前心肌纤维常用染色方法在定量分析中 存在的胶原纤维漏读及误读等问题,为心肌纤维化半定量及诊断提供参考。

目的 对目前已有心肌纤维化染色方法进行优化,弥补目前心肌纤维常用染色方法在定量分析中 存在的胶原纤维漏读及误读等问题,为心肌纤维化半定量及诊断提供参考。

方法 利用实验室前期构建的心肌组 织特异性 cTnT R141W 基因突变致扩张型心肌病转基因小鼠模型,制备心脏组织石蜡切片,分别进行马松三色 (Masson’s trichrome,Masson)染色法、天狼星红(picric sirius red,PSR)染色法、天狼星红⁃品红(van Gieson,VG)染色 法、天狼星红⁃固绿(sirius red / fast green staining,SR/ FG)染色法染色,利用 Image J 2.1.0 软件对胶原纤维面积进行 定量比较,并从染液浓度、染色时间、酸性溶液预染 3 个方面对 SR/ FG 染色法进行优化,对后续的胶原纤维定量分 析进行应用验证。

结果 4 种特染方法均可实现胶原纤维的分布观察,其中,优化后的 SR/ FG 染色法,即 0.1%天 狼星红⁃苦味酸酸性溶液预染 5 min,随后于 0.1%天狼星红⁃苦味酸与 0.04%固绿的混合液中染色 1 h,在软件识别 中具有更低的漏读率和遗失率。

结论 本文优化后的 SR/ FG 染色法较其他传统胶原纤维特染方法,胶原纤维与 心肌组织着色鲜亮、颜色对比明显、稳定性佳、方便快捷,更适用于后续胶原纤维占比定量分析应用。

阅读原文:心肌纤维化特殊染色方法比较与优化.pdf

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