乙酸灌肠联合束缚夹尾应激诱导肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征大鼠模型的制备
目的 建立理想的大鼠肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征( diarrhea predominant irritable bowel syndrome,IBS⁃D)的造模方法,为 IBS⁃D 伴焦虑抑郁状态的临床研究提供动物模型基础。
方法 本研究共用 60 只 大鼠:(1)首先将 20 只大鼠随机分为空白组、3%乙酸灌肠组、4%乙酸灌肠组、5%乙酸灌肠组,造模及观察期结束 后,通过腹泻相关指数、结肠病理组织学等观察不同造模浓度引起的腹泻状态及结肠损伤程度。 (2)评估出较优造 模浓度后,将另外 40 只大鼠随机分为对照组(a 组)、单纯乙酸灌肠组(b 组)、乙酸 + 束缚组(c 组)、乙酸 + 束缚 + 夹尾组(d 组),分别予以不同干预,共干预 8 d。 干预结束后对大鼠一般情况、腹泻相关指数、旷场实验( open⁃field test,OFT)评分、结肠病理组织学等指标进行评价。
结果 (1)与空白组比较,4%乙酸灌肠组干预后第 1 ~ 3 天粪 便性状评分升高(P < 0.001),干预后第 4 ~ 7 天粪便性状评分逐渐降低,1 周后,与空白组相比,粪便性状评分无 显著性差异(P > 0.05),体重相对较低(P < 0.01),粪便含水量升高(P < 0.001);与空白组相比,5%乙酸灌肠组体 重较低(P < 0.001),粪便性状评分、粪便含水量、腹泻指数升高(P < 0.01);3%乙酸灌肠组与空白组相比,无显著 性差异(P > 0.05)。 结肠病理组织显示,与空白组相比,4%乙酸灌肠组黏膜结构完整,有少量炎症细胞浸润,病理 组织评分无显著性差异(P > 0.05),5%乙酸灌肠组有中量⁃大量炎症细胞浸润,病理组织评分升高(P < 0.01)。 (2)与 a 组比较,b 组体重较低(P < 0.001),粪便性状评分、粪便含水量、腹泻指数升高(P < 0.01),与 a 组及 b 组 比较,c 组和 d 组,体重较低(P < 0.001),粪便性状评分、粪便含水量、腹泻指数升高(P < 0.01),结肠运转时间减 少(P < 0.01);与 c 组相比,d 组粪便含水量较高(P < 0.001)。 在 OFT 评分方面,与 a 组及 b 组相比,c 组及 d 组 OFT 评分在总距离、站立次数、直立次数均减少(P < 0.05);与 c 组相比,d 组在 OFT 评分总距离、站立次数、直立次 数均减少(P < 0.05)。 结肠病理组织显示,4 组黏膜结构均完整,有不同程度的炎症细胞浸润,病理组织评分上,与 a 组及 b 组相比,c 组和 d 组较高(P < 0.05)。
结论 4%乙酸浓度为 IBS⁃D 造模适宜浓度,叠加束缚后,能更好地 模拟 IBS⁃D 腹泻、内脏高敏感特征性状态,叠加夹尾后能成功制备出肝郁脾虚型 IBS⁃D 模型。
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