学术文章
没食子酸对脂多糖诱导的人ＴＨＰ１巨噬细胞炎症反应的抑制作用
目的 探讨没食子酸（ ｇａｌｌｉｃ ａｃｉｄ，ＧＡ）对脂多糖（ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）诱导的人 ＴＨＰ１ 巨噬细胞 炎症反应的抑制作用。
方法 将人 ＴＨＰ１ 单核细胞用佛波酯（ ｐｈｏｒｂｏｌ ｍｙｒｉｓｔａｔｅ ａｃｅｔａｔｅ，ＰＭＡ）分化为巨噬细胞，用 ＬＰＳ 诱导建立巨噬细胞炎症模型，给予不同浓度 ＧＡ 进行保护。 ＣＣＫ⁃８ 法筛选 ＬＰＳ 和 ＧＡ 对 ＴＨＰ１ 细胞的安全浓 度；设正常组、模型组（１００ μｇ ／ Ｌ ＬＰＳ）和 ＧＡ 组（１００ μｇ ／ Ｌ ＬＰＳ＋不同浓度 ＧＡ）。 ＥＬＩＳＡ 法检测各组细胞培养液白细 胞介素－６（ＩＬ⁃６）、肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ⁃α）和白细胞介素－１β（ ＩＬ⁃１β）水平，微板法检测各组细胞培养液乳酸脱氢 酶（ｌａｃｔａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＬＤＨ）活性和一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ，ＮＯ）含量，荧光染色检测各组细胞活性氧（ＲＯＳ）水平、 细胞损伤情况和线粒体跨膜电位的变化，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 法检测各组细胞环氧合酶－２（ＣＯＸ⁃２）、高迁移率族蛋白 Ｂ１ （ＨＭＧＢ１）、ｃ⁃Ｊｕｎ 氨基末端激酶（ＪＮＫ）、细胞外调节蛋白激酶（ＥＲＫ）、Ｐ３８ 丝裂原活化蛋白激酶（Ｐ３８）、核转录因子 －κＢ（ＮＦ⁃κＢ）、ＮＯＤ 样受体 ３（ＮＯＤ⁃ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ３，ＮＬＲＰ３）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶－１（Ｃａｓｐａｓｅ⁃１）、ＩＬ⁃１β 和消皮素 Ｄ（Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ Ｄ，ＧＳＤＭＤ）蛋白表达的影响。
结果 与正常组比较，模型组细胞培养液 ＩＬ⁃６、ＴＮＦ⁃α、ＩＬ⁃１β 和 ＮＯ 的分泌增多（Ｐ＜０.０５），ＣＯＸ⁃２、ＨＭＧＢ１、ｐ⁃ＥＲＫ、ｐ⁃ＪＮＫ、ｐ⁃Ｐ３８、ｐ⁃ＮＦ⁃κＢ、ＮＬＲＰ３、Ｃａｓｐａｓｅ⁃１ 和 ＩＬ⁃１β 蛋白表达 升高（Ｐ＜０.０５），ＧＳＤＭＤ 蛋白表达水平降低（Ｐ＜０.０５），ＲＯＳ 生成和细胞损伤明显增多，线粒体跨膜电位较正常组显 著降低，ＬＤＨ 活性显著升高（Ｐ＜０.０５）；与模型组比较，ＧＡ 组细胞培养液 ＩＬ⁃６、ＴＮＦ⁃α、ＩＬ⁃１β 和 ＮＯ 的分泌减少（Ｐ＜ ０.０５），ＣＯＸ⁃２、ＨＭＧＢ１、ｐ⁃ＥＲＫ、ｐ⁃ＪＮＫ、ｐ⁃Ｐ３８、ｐ⁃ＮＦ⁃κＢ、ＮＬＲＰ３、Ｃａｓｐａｓｅ⁃１ 和 ＩＬ⁃１β 蛋白表达降低（Ｐ＜０.０５），ＧＳＤＭＤ 蛋白表达水平升高（Ｐ＜０.０５），ＲＯＳ 生成和细胞损伤减少，线粒体跨膜电位逐渐升高，ＬＤＨ 活性降低（Ｐ＜０.０５）。
结论 ＧＡ 对 ＬＰＳ 诱导的人 ＴＨＰ１ 巨噬细胞炎症反应具有抑制作用，其抗炎机制可能涉及 ＭＡＰＫ 和 ＮＦ⁃κＢ 信号 通路。
