目的 比较四氯化碳（ＣＣｌ _４ ）和 ３，５－二乙氧基羰基－１，４－二氢可力丁（ＤＤＣ）两种肝毒性化学物诱导 的肝纤维化小鼠模型的转录组学差异，为使用肝纤维化小鼠模型的研究提供参考依据。

方法 分别采用 １０％ ＣＣｌ _４ （２ ｍＬ／ ｋｇ）腹腔注射和 ０.１％ ＤＤＣ 饮食喂养诱导小鼠肝纤维化模型。 造模 ４ 周后，检测血清 ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＢｉｌ 水平； ＨＥ 染色观察肝内炎症浸润情况；天狼猩红染色观察肝胶原沉积情况；Ｊａｍａｌｌ’ｓ 法测定肝组织羟脯氨酸（Ｈｙｐ）含量； ＥＬＩＳＡ 检测肝组织上清 ＴＮＦ⁃α、ＩＬ⁃６ 和 ＩＬ⁃１β 含量。 提取小鼠总 ＲＮＡ 进行测序（ＲＮＡ⁃Ｓｅｑ），使用 Ｒ 软件分析 ２ 种肝 纤维化模型的差异基因，并进行 ＧＯ 和 ＫＥＧＧ 富集分析，并验证差异显著的基因。

结果 与正常小鼠相比，ＣＣｌ _４ 染 毒小鼠和 ＤＤＣ 饮食小鼠血清 ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＢｉｌ 水平和肝组织 ＴＮＦ⁃α、ＩＬ⁃６ 和 ＩＬ⁃１β 含量显著升高，血清 Ａｌｂ 水平下 降。 病理染色提示 ＣＣｌ _４ 染毒小鼠肝组织结构破坏，中央静脉周围大量肝细胞玻璃样变及坏死；ＤＤＣ 饮食小鼠肝内 卟啉沉积，大量炎症细胞在汇管区和胆管周围浸润；两种模型小鼠肝内均有不同程度胶原沉积。 通过筛选条件（|ｌｏｇＦＣ |＞２ 倍且 Ｐ＜０.０５）获得 ＣＣｌ _４ 染毒模型、ＤＤＣ 饮食模型的差异基因分别为 １８２０、２３７３ 个，其中上调基因分别 为 １３０２、１９７８ 个，下调基因分别为 ５１８、３９５ 个。 ＧＯ 注释发现 ２ 种模型在分子功能（ＭＦ）、生物学过程（ＢＰ）、细胞成 分（ＣＣ）等方面具有重要功能，ＫＥＧＧ 分析发现 ＣＣｌ _４ 染毒模型、ＤＤＣ 饮食模型分别激活 ２２、２９ 条信号通路，其中细 胞外基质受体的相互作用、细胞周期、蛋白的消化与吸收、焦点粘附、ＰＩ３Ｋ⁃Ａｋｔ 等 １６ 条信号通路在 ２ 种模型中均显 著富集（Ｐ＜０.０５）。 聚类分析发现在 ２ 种模型中均明显下调基因包括 Ｍｕｐ１１、Ｍｕｐ１５、Ｍｕｐ１７、Ｍｕｐ１ 等，采用 ＲＴ⁃ ｑＰＣＲ 得以证实（Ｐ＜０.０５）。

结论 本研究报道了 ＣＣｌ ４ 染毒和 ＤＤＣ 饮食两种肝纤维化模型的 ＲＮＡ⁃Ｓｅｑ 转录组学特 点并进行比较，观察基因表达的场所、基因表达所调节的通路等方面，为后续肝纤维化的发病机制和治疗研究的动 物模型的选择提供参考依据。

阅读原文：两种肝毒性化学物诱导的肝纤维化小鼠模型转录组学的比较研究.pdf