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基于免疫炎症-肠道微生态探讨清热解毒方对痛风小鼠治疗作用的研究

2024年07月01日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志2024年第5期 作者:何宪顺 林锟 陆舜 韦雨柔 田佳庆 江禹来 魏腾飞 林天烨 何敏聪 魏秋实 责任编辑:lascn
摘要:探究清热解毒方对痛风小鼠抗炎作用及对肠道菌群的影响。

目的 探究清热解毒方对痛风小鼠抗炎作用及对肠道菌群的影响。

方法 将 40 只 7~ 8 周龄、体重 20~ 22 g 的 SPF 级 C57BL/ 6 雄性小鼠随机分为空白组(CON 组)、模型组(MOD 组)、别嘌醇组(ALLO 组)、清热解 毒方组(QRJD 组),第 1~ 35 天每天早上 CON 组灌胃 10 g / 0.1 mL 羧甲基纤维素,其余各组均灌胃氧嗪酸钾(500 mg / kg)+酵母膏(10 g / kg)混悬液制备高尿酸血症小鼠模型;第 29 天在异氟烷麻醉下,往 CON 组小鼠右踝关节注 射 50 μL 无菌羧甲基纤维素,其余各组小鼠右踝关节注射等量尿酸钠溶液(50 mg / mL)制备痛风性关节炎模型,同 时各组每天灌服相应药物进行治疗;第 35 天取材,取材小鼠禁食不禁水 6 h,检测血尿酸、血肌酐、尿素氮等血液指 标,踝关节苏木精-伊红、番红-固绿染色;踝关节免疫组化检测白细胞介素-10( interleukin 10,IL⁃10)、转化生长因 子-β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)抗炎指标;收集小鼠盲肠内容物,采用 16S rDNA 高通量测序法检测肠 道菌群变化。

结果 (1)用药治疗 7 d 后,与 MOD 组相比,QRJD 组能有效降低疾病模型小鼠血尿酸(P<0.001)、 肌酐(P<0.01)、尿素氮(P<0.05)浓度,有效保护肾功能。 (2)病理结果提示,与 MOD 组相比,苏木精-伊红染色发 现 QRJD 组治疗后,关节滑膜增生有所减少,炎症细胞浸润得到减轻;番红-固绿发现中药复方软骨排列较前有序, 软骨破坏较 MOD 组减轻,基质未见失染。 (3)踝关节免疫组化结果提示 CON 组、MOD 组 IL⁃10、TGF⁃β1 未见明显 升高;与 MOD 组相比,QRJD 组的 IL⁃10、TGF⁃β1 表达升高(P<0.05)。 (4)肠道菌群交互关系、多样性上,与 CON 组 相比,MOD 组特有的 OTUs 数目增加 75 个,而 QRJD 能减少 MOD 特有的 OTUs 数量,更接近 CON 组;4 组间的 α 多 样性未见明显差异(P>0.05),而 β 多样性发现 QRJD 组的菌群组成更趋向于 CON 组水平(P = 0.001)。 (5)肠道 菌群差异分析结果显示,与 CON 组相比,MOD 组 Ruminococcaceae spp. 、Dubosiella sp. 、Tyzzerella sp. 、Ileibacterium sp. 和 Bacteroidales spp. 等丰度增高(P< 0.05);与 MOD 组对比,QRJD 组 Lactobacillus sp. 、Ligilactobacillus sp. 和 Bacteroides sp. 等丰度上升(P<0.05),且肠道菌群相互作用图显示菌群之间存在相互作用。 (6)肠道菌群与肾功 能、抗炎因子相关性分析中,Dubosiella sp. 、Tyzzerella sp. 、Bacteroidales spp. 的相对丰度与 SUA、SCR 呈显著正相关 (P<0.05);而 Lactobacillus sp. 、Ligilactobacillus sp. 、Mitochondria spp. 与 IL⁃10、TGF⁃β1 抗炎因子呈正相关,其中与 TGF⁃β1 较为显著(P<0.05)。 (7)COG 功能预测提示 QRJD 组功能集中于无机离子转运和代谢、碳水化合物运输与代谢等。

结论 QRJD 能有效调节免疫炎症-肠道微生态紊乱从而治疗痛风疾病,推测其防治痛风的机制是调节 肠道菌群多样性以及调控 Ruminococcaceae spp. 、Dubosiella sp、Lactobacillus sp. 等差异菌群丰度实现治疗痛风的 目的。

阅读原文:基于免疫炎症-肠道微生态探讨清热解毒方对痛风小鼠治疗作用的研究.pdf

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