学术文章
WHBE兔膝骨关节炎模型的建立与PRFr的干预研究
目的 采用内侧副韧带和部分髌韧带切除术建立 WHBE 兔 KOA 模型并用富血小板纤维蛋白释放 液(PRFr)干预,探讨 WHBE 兔 KOA 模型软骨损伤和炎症的机制以及 PRFr 干预疗效。
方法 取 WHBE 兔 24 只, 随机分成 3 组,即对照(NC)组(n = 6)、模型(KOA)组( n = 12)和治疗(PRFr)组( n = 6);其中 KOA 组和 PRFr 组分 别于术后第 7 天和第 14 天时向两侧关节腔内注射生理盐水和 PRFr 0.5 mL。 造模 4、8 周时,各组动物进行行为学 评分、X 线影像学观察,并取血清进行 ELISA 检测 IL⁃1β、TNF⁃α、MMP⁃13 水平,4 周时 KOA 组处理 6 只,8 周时处理 各组剩余动物,取兔双侧膝关节,进行大体评分,脱钙后行病理切片制作,然后进行 HE 染色、甲苯胺蓝染色和番红 O 固绿染色以及 TGF⁃β、BMP3 和 NF⁃κB 免疫组化表达检测。
结果 与 NC 组比,造模后 WHBE 兔 Lequesne MG 行 为学评分,Mankin’s 评分,Pelletier 评分均显著升高(P<0.01),可见膝关节肿胀明显、关节疼痛刺激和活动受限明 显,且 X 光显示软组织呈高密度阴影,关节积液较多,解剖观察显示关节面粗糙,病理观察显示软骨表面缺损,软骨 细胞丢失或部分丢失,表明 WHBE 兔 KOA 模型成立。 与 KOA 组比较,PRFr 干预治疗后血清炎症水平( IL⁃1β、 TNF⁃α、MMP⁃13)均显著降低(P<0.05,P<0.01),软骨表面粗糙程度低,大部分软骨细胞分布整齐;同时 TGF⁃β、 BMP3 和 NF⁃κB 表达水平亦显著降低(P<0.01)。
结论 本研究成功建立了 WHBE 兔 KOA 模型,且 PRFr 可通过 TGF⁃β/ BMP 和 NF⁃κB 途径改善 WHBE 兔 KOA 模型软骨损伤和炎症。