学术文章
Ａｄｒａ１ａ调节ＬＰＳ诱导的Ｌｂｐ－／－小鼠原代肝细胞炎症反应
目的 探究 Ａｄｒａ１ａ 调节 ＬＰＳ 诱导的 ＬＢＰ 敲除小鼠（Ｌｂｐ － ／ － ）原代肝细胞炎症反应。
方法 利用二步 灌流法提取 ＷＴ 型、Ｌｂｐ － ／ －型小鼠原代肝细胞，构建由 ＬＰＳ 诱发的原代肝细胞原发炎症模型；采用加入抑制剂哌唑 嗪、转染 ｓｉＲＮＡ 来下调 ＬＢＰ 敲除小鼠原代肝细胞 Ａｄｒａ１ａ 的表达；抑制剂法将原代肝细胞分为 ３ 组分别是对照组 Ａ、ＬＰＳ 组 Ａ、抑制剂哌唑嗪组，转染 ｓｉＲＮＡ 主要是对原代肝细胞进行分组，包括对照组 Ｂ、ＬＰＳ 组 Ｂ、ｓｉ⁃ＮＣ 组、ｓｉ⁃ Ａｄｒａ１ａ 组；将 ＷＴ 型小鼠的原代肝细胞分为两组分别为对照组（空白对照）、ＬＰＳ 组（ＬＰＳ 刺激 １２ ｈ）。 本研究以 ＷＴ 型、Ｌｂｐ － ／ －型小鼠原代肝细胞为研究对象利用 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 方法验证 Ａｄｒａ１ａ 在 ＬＰＳ 刺激下的变化情况，采用 ＣＣＫ⁃８、 ｑＲＴ⁃ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 等实验方法验证哌唑嗪及 ｓｉ⁃Ａｄｒａ１ａ 对 Ｌｂｐ － ／ － 小鼠的原代肝细胞的炎症及存活率的改善情 况。
结果 在 ＬＰＳ 刺激下 Ｌｂｐ － ／ －小鼠的原代肝细胞 Ａｄｒａ１ａ 蛋白表达显著升高（Ｐ＜０.０１），而野生型没有显著变化； 抑制剂哌唑嗪组及干扰组的细胞存活率显著升高（Ｐ＜０.０１，Ｐ＜０.０５）；抑制剂哌唑嗪组及 ｓｉ⁃Ａｄｒａ１ａ 组的 ＴＮＦ⁃α、ＩＬ⁃ １β 炎症因子表达情况显著降低（Ｐ＜０.０１），与细胞损伤及炎症相关的蛋白 ｐ⁃ｐ３８、ｐ⁃ＥＲＫ、ｐ⁃ＪＮＫ 的表达量也显著降 低（Ｐ＜０.０１）。
结论 ＬＰＳ 刺激 Ｌｂｐ － ／ －小鼠原代肝细胞后 Ａｄｒａ１ａ 表达上调、炎症信号因子上调，使用哌唑嗪与 ｓｉ⁃ Ａｄｒａ１ａ 特异性降低 Ａｄｒａ１ａ 表达后使 ＬＰＳ 相关的 Ｌｂｐ － ／ －小鼠原代肝细胞炎症因子明显下降，可验证敲除 ＬＢＰ 导致 Ａｄｒａ１ａ 在 ＬＰＳ 诱导的炎症调节中参与反应。
